Биотехнология: Монография. Волова Т.Г. - 134 стр.

UptoLike

Составители:

Рубрика:

133

В клетках E. coli также осуществлен синтез проинсулина, а не только

его отдельных цепей. На выделенной матричной мРНК синтезировали

ДНК-копию. Синтез проинсулина имеет определенные преимущества, так

как процедуры экстракции и очистки гормона минимальны.

Совершенствование техники получения генноинженерных штаммов-

продуцентов с помощью различных приемов (амплификацией плазмид,

инкапсулированием вводимых рекомбинантных ДНК, подавлением про-

теолитической

активности реципиентных клеток) позволило получить

высокие выходы гормона, до 200 мг/л культуры. Медико-биологические и

клинические испытания генноинженерного белка показали пригодность

препарата, и в 1982 г. он был допущен к производству во многих странах.

Pst

Ген устойчивости

к тетрациклину

Ген устойчивости

к тетрациклину

Ген

пенициллиназы

Ген

пенициллиназы

Пенициллиназа

Ген

проинсулина

Проинсулин

Инсулин

Рис. 4.3. Биосинтез инсулина крысы в сконструированных клетках E. coli

(по Gilbert e.a., 1980).

а) карта плазмиды pBR322 c двумя генами – пенициллиназы и устойчивости к тетрациклину;

б) карта, полученная при определении последовательности кДНК рекомбинантной плазмиды

в продуцирующем инсулин клоне E. coli; в) гибридный белок; г) биологически активный инсулин

после удаления пенициллиназы и сегмента проинсулина.