Биотехнология: Монография. Волова Т.Г. - 136 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

СФУ | Красноярск

Составители: 

Рубрика: 

135
что при получении препарата могло произойти заражение организма мед-
ленно развивающими вирусами. Поэтому дети, получавшие данный пре-
парат, нуждались в многолетнем медицинском наблюдении.
Генноинженерный препарат имеет несомненные преимущества: досту-
пен в больших количествах, гомогенен, не содержит вирусов. Синтез сома-
тотропина, состоящего из 191 аминокислотного остатка, был осуществлен в
США Гедделем с сотрудниками
в 1979 г. (компания «Генентек») (рис. 4.4).
При химико-ферментном синтезе ДНК получается ген, кодирующий
предшественник соматотропина, поэтому был выбран специальный путь
клонирования. На первом этапе клонировали двунитевую ДНК-копию
мРНК и расщеплением рестиктазами получали последовательность, коди-
рующую всю аминокислотную последовательность гормона, кроме пер-
вых 23 аминокислот. Далее клонировали синтетический полинуклеотид,
соответствующий этим 23
аминокислотам со стартовым ANG кодоном в
начале. Два полученных фрагмента соединяли и подстраивали к паре lac-
промоторов и участку связывания рибосом. Сконструированный ген
трансплантировали в E. coli. Синтезированный в бактериях гормон обла-
дал требуемой молекулярной массой, не был связан с каким-либо белком;
его выход составлял около 100 000 молекул на клетку. Гормон, однако,
содержал на N-конце
полипептидной цепи дополнительный остаток ме-
тионина; при удалении последнего выход гормона был низким.
В 1980 г. были получены доказательства того, что генноинженерный
соматотропин обладает биологической активностью нативного гормона.
Клинические испытания препарата также прошли успешно. В 1982 г. гор-
мон был получен также на основе сконструированной кишечной палочки
в Институте Пастера в Париже.
Стоимость гормона к 1990 г. снизилась до
5 долларов/ед. В настоящее время его начинают применять в животновод-
стве для стимулирования роста домашнего скота, удоев и др.
Получение интерферонов
Интерфероны – группа белков, способных продуцироваться в ядер-
ных клетках позвоночных. Это мощные индуцибельные белки, являю-
щиеся фактором неспецифической резистентности, поддерживающего
гомеостаз организма. Система
интерферонов обладает регуляторной
функцией в организме, так как способна модифицировать различные
биохимические процессы. Интерфероны позвоночных, в том числе че-
ловека, разделяют на три группы:
α, β, γ, соответственно, лейкоцитар-
ные, фибробластные и иммунные.
В конце 70-х гг. стала очевидной потенциальная значимость интерфе-
ронов для медицины, в том числе профилактики онкологических заболе-
ваний. Клинические испытания сдерживались отсутствием достаточных
количеств интерферонов и высокой стоимостью препаратов, полученных
традиционным способом (выделение из крови). Так, в 1978 г. для получе-
ния 0.1 г чистого
интерферона в Центральной лаборатории здравоохране-

Страницы