Биотехнология: Монография. Волова Т.Г. - 139 стр.

UptoLike

Составители: 

Рубрика: 

138
формация и трансдукция у прокариот, а также универсальный метод
слияние протопластов).
При гибридизации берут генетически маркированные штаммы микро-
организмов (чаще ауксотрофные мутанты или мутанты, устойчивые к ин-
гибиторам роста). В результате слияния клеток (копуляции) происходит
образование гибридов у дрожжей, грибов, водорослей. Если исходные
клетки были гаплоидными, в результате слияния ядер появляется
дипло-
идная клетка (зигота), несущая в ядре двойной набор хромосом. У отдель-
ных представителей ядро сразу подвергается мейозу, в ходе которого ка-
ждая из хромосом расщепляется. Гомологичные хромосомы образуют
пары и обмениваются частями своих хроматид в результате кроссингове-
ра. Далее формируются гаплоидные половые споры, каждая из которых
содержит набор генов,
которыми различались родительские клетки, в ре-
зультате рекомбинации генов одной и той же хромосомы, а также разных
хромосом при распределении хромосомных пар. Если после слияния ядра
не сливаются, образуются формы со смешенной цитоплазмой и ядрами
разного происхождения (гетерокарионы). Такие формы свойственны гри-
бам, особенно продуцентам пенициллинов. При размножении полученных
гетерозиготных диплоидов
или гетерокарионов происходит расщепление
проявление в потомстве, обнаруживающих не только доминантные, но и
рецессивные признаки родителей. Половой и парасексуальный процесс
широко используют в генетической практике промышленно важных мик-
роорганизмов-продуцентов.
У бактерий обмен генетической информацией происходит в результате
взаимодействия конъюгативных плазмид (конъюгации). Впервые
конъюгацию наблюдали у E. coli K-12. Для конъюгационного скрещива-
ния культуру донора и реципиента смешивают и совместно инкубируют в
питательном бульоне или на поверхности агаризованных сред. Клетки при
помощи образующегося конъюгационного мостика соединяются между
собой; через мостик осуществляется передача определенного сайта плаз-
мидной хромосомы к реципиенту. Так, при 37°С для переноса всей хромо-
сомы требуется около 90 минут. Конъюгация открыла и
открывает широ-
кие перспективы для генетического анализа и конструирования штаммов.
Трансдукцияпроцесс переноса генетической информации от
клетки реципиента к клетке-донору с помощью фага. Впервые этот
процесс был описан в 1952 г. Циндером и Лидербергом. Трансдукция ос-
нована на том, что в процессе размножения фагов в бактериях возможно
образование частиц, которые
содержат фаговую ДНК и фрагменты бакте-
риальной ДНК. Для осуществления трансдукции нужно размножить фаг в
клетках штамма-донора, а затем заразить им клетки-реципиента. Отбор
рекомбинантных форм проводят на селективных средах, не поддержи-
вающих роста исходных форм.