Биотехнология: Монография. Волова Т.Г. - 200 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

СФУ | Красноярск

Составители: 

Рубрика: 

199
ет с фазой образования продукта; клетки легко переносятся в новую среду
или иные культивационные условия. Основные трудности данной техно-
логии связаны с недостаточной изученностью регуляции метаболизма у
эукариотических растительных клеток.
Особенностью клеточных культур растений является их способность к
тотипотенции, – в определенной среде и определенных условиях можно
регенерировать целое растение из одной
клетки. Подобное свойство от-
сутствует у животных. Таким образом, в любой растительной клетке за-
ложена генетическая информация, необходимая для дифференцировки
клеток в процессе деления. Этот феномен используют при микроразмно-
жении растений. Данная технология имеет существенные преимущества,
так как позволяет быстро получать материал для размножения растений,
включая системы, не содержащие возбудителей
болезней, круглогодично
иметь рассадочный материал и повышать его однородность, длительно
хранить генетический материал и создавать новые генотипы.
С тех пор, как впервые удалось индуцировать из одной клетки регене-
рацию целого растения, техника культуры клеток стала широко приме-
няться для клонирования. Тотипотенция была продемонстрирована на
культурах тканей ряда растительных видов, а позднее
– на соматических и
половых клетках, изолированных из различных растений.
На рис.6.3 представлена схема клонального размножения растений
Catharanthus roseus из верхушечных меристем. После проращивания сте-
рильных семян C. roseus через 7 дней кончики побегов проростков срезали
и проращивали в темноте, затем кончики проростков помещали на по-
верхность агаризованной среды Нича и культивировали на свету. Спустя 8
недель
из апикальных меристем формировались прорости с развитой кор-
невой системой. Эти проростки использовали для второго этапа размно-
жения, в ходе которого эксплантанты, состоящие из одного узла и одной
пары листьев формировали проростки с корнями и 4–5 парами листьев.
После третьего пассажа развивались проростки с тем же числом узлов.
Укоренившиеся проростки пересаживали
в горшки со стерильной почвой.
После 14-дневного периода акклиматизации проростки высаживали в поч-
ву; выживаемость проростков при этом составила 90 %.
В 1971 г. Табеке с сотрудниками, обрабатывая листья табака с целью
растворения клеточных стенок сочетанием целлюлозы и пектиназы, доби-
лись успеха в получении протопластов. Протопласты при культивирова-
нии в жидкой среде в процессе
деления формировали каллус, способный к
регенерации целого растения. При этом свыше 90 % протоклонов (клонов,
полученных из протопластов) были удивительно сходны с родительскими
видами как по фенотипу, так и по генотипу. Протопласты позволили пре-
одолеть обычную изменчивость, свойственную другим способам получе-

Страницы