Биотехнология: Монография. Волова Т.Г. - 208 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

СФУ | Красноярск

Составители: 

Рубрика: 

207
Основными направлениями работ по соматической гибридизации высших
растений являются: гибридизация клеток как средство расширения рамок
скрещивания; слияние клеток и перенос или реконструкция генов цито-
плазмы; слияние клеток с целью переноса отдельных небольших фрагмен-
тов генома. При гибридизации соматических клеток возможно получение
асимметричных гибридов, что может способствовать получению более
устойчивых и функционально
совершенных растений.
Генетическая инженерия растений
Исследования в области генетической инженерии растений только на-
чинаются. При использовании новейших генетических методов примени-
тельно к высшим растениям возникают не только технические трудности;
процедура также осложняется необходимостью решать дополнительные
проблемы, связанные с нарушением структуры генома культивируемых
растительных клеток (изменение плоидности, хромосомные перестройки).
Имеются определенные
успехи в разработке систем клонирования неко-
торых важных сельскохозяйственных культур по схеме «протопласт –
суспензионная культура – каллус – целое растение». Интенсивно иссле-
дуются структура и функции плазмидных ДНК растений и возможности
их использования в качестве векторов.
Проблема создания векторов для введения чужеродной ДНК в протопла-
сты растений является наиболее сложной. Здесь наметились следующие
подходы: 1) использование плазмид бактерий, заражающих растения в есте-
ственных условиях; при этом часть плазмиды встраивается в ядерный геном
растения-хозяина и функционирует в составе его генома; 2) использование
бактериальных плазмид, «сшитых» с фрагментами ДНК хлоропластов или
митохондрий растений, для создания челночных векторов, способных к ре-
пликации в клетках прокариот и экспрессии
в эукариотических клетках; 3)
использование ДНК-содержащих вирусов растений; в такой системе ДНК
функционирует автономно от генома растения-хозяина.
Для защиты чужеродного генетического материала, вводимого в про-
топласты растений, от разрушающего действия нуклеаз также разрабаты-
ваются новые методы. Применяются ингибирование нуклеаз и создание
механической защиты рекомбинантных ДНК. Для такой защиты исполь-
зуют
липосомы. С помощью липосом в клетки или протопласты эукариот
введены крупная РНК вируса табачной мозаики (размером около 2
⋅10
6
),
еще более крупные ДНК вируса ОВ40 и Ti-плазмида Agrobacterium
tumifaciens. надежная защита липосомами нуклеиновых кислот особенно
важна при манипуляции с протопластами растений. Примером реализо-
ванного генноинженерного проекта является синтез фазеолина (запасного
белка фасоли) в регенерированных растениях табака. Трансплантация ге-
на, кодирующего синтез фазеолина, проведена с использованием в качест-
ве вектора Ti-плазмиды. С
помощью этой плазмиды в растения табака
внедрен ген устойчивости в неомицину. С помощью CMV-вируса в расте-

Страницы