Большой практикум по биоэкологии. Ч. 1. Воскресенская О.Л - 85 стр.

UptoLike

Рубрика: 

85
или 95-96%-ным спиртом, добавив немного стеклянного или кварцевого
песка и щепотку углекислого натрия или химически чистого мела (угле-
кислого кальция) для нейтрализации кислот. Ацетон или спирт прили-
вают небольшими порциями (по 10-15 мл). Экстрагирование повторяют
несколько раз. Вытяжки сливают в мерный цилиндр на 100 мл. Извле-
чение продолжают до получения бесцветного экстракта. Раствор в мер-
ном цилиндре доводят ацетоном или спиртом до определенного объема
(50-100 мл).
2. Хроматографическую бумагу нарезают на полоски длиной 25
см и шириной, 15 см 0,5-1 мл ацетонового (или спиртового) раствора
пигментов наносят виде полосы) на полоску хроматографической бу-
маги на расстоянии 4 см от ее нижнего края. Бумагу подсушивают на
воздухе (лучше всего с помощью фена) в затененном месте и затем сво-
рачивают в однослойную трубку, верхний конец которой сшивают или
скрепляют пластмассовой скрепкой. Трубку ставят на дно стеклянного
сосуда, куда заранее был налит петролейный эфир или низкокипящий
бензин слоем в 2-3 см (он должен быть ниже места нанесения раствора
пигментов на бумагу).
3. Через 20-30 мин бумажную трубку вынимают из сосуда. Вы-
резают полоску бумаги, окрашенную в желто-оранжевый цвет (она
находится сразу же за фронтом подъема растворителя), измельчают ее
(нарезают) в стеклянный бюкс или стаканчик и извлекают каротины не-
большими порциями (по 1-2 мл) петролейного эфира или бензина, по-
вторяя экстрагирование до получения бесцветного раствора. Раствор
каротинов доводят этими же растворителями до определенного объема
(например, 10-20 мл) и колориметрируют, употребляя в качестве стан-
дартного рабочий раствор азобензола (14,5 мг в 100 мл). При колори-
метрировании каротинов пользуются синим светофильтром.
4. Содержание каротина рассчитывают по форму-
ле:
,
10000235,0
22
131
hНv
hvv
Х
где Х содержание каротина, мг/100 г растительного материала;
v
1
объем ацетонового (или спиртового) экстракта пигментов в
мерном цилиндре, мл;
v
2
объем ацетонового (или спиртового) экстракта, нанесенный на
бумагу, мл;
v
3
объем раствора каротинов в петролейном эфире или бензине,
взятый для колориметрирования, мл;
h
1
показания шкалы колориметра для стандартного раствора;
h
2
показания шкалы колориметра для исследуемого раствора
(среднее из 5-6 определений);
или 95-96%-ным спиртом, добавив немного стеклянного или кварцевого
песка и щепотку углекислого натрия или химически чистого мела (угле-
кислого кальция) для нейтрализации кислот. Ацетон или спирт прили-
вают небольшими порциями (по 10-15 мл). Экстрагирование повторяют
несколько раз. Вытяжки сливают в мерный цилиндр на 100 мл. Извле-
чение продолжают до получения бесцветного экстракта. Раствор в мер-
ном цилиндре доводят ацетоном или спиртом до определенного объема
(50-100 мл).
        2. Хроматографическую бумагу нарезают на полоски длиной 25
см и шириной, 15 см 0,5-1 мл ацетонового (или спиртового) раствора
пигментов наносят (в виде полосы) на полоску хроматографической бу-
маги на расстоянии 4 см от ее нижнего края. Бумагу подсушивают на
воздухе (лучше всего с помощью фена) в затененном месте и затем сво-
рачивают в однослойную трубку, верхний конец которой сшивают или
скрепляют пластмассовой скрепкой. Трубку ставят на дно стеклянного
сосуда, куда заранее был налит петролейный эфир или низкокипящий
бензин слоем в 2-3 см (он должен быть ниже места нанесения раствора
пигментов на бумагу).
        3. Через 20-30 мин бумажную трубку вынимают из сосуда. Вы-
резают полоску бумаги, окрашенную в желто-оранжевый цвет (она
находится сразу же за фронтом подъема растворителя), измельчают ее
(нарезают) в стеклянный бюкс или стаканчик и извлекают каротины не-
большими порциями (по 1-2 мл) петролейного эфира или бензина, по-
вторяя экстрагирование до получения бесцветного раствора. Раствор
каротинов доводят этими же растворителями до определенного объема
(например, 10-20 мл) и колориметрируют, употребляя в качестве стан-
дартного рабочий раствор азобензола (14,5 мг в 100 мл). При колори-
метрировании каротинов пользуются синим светофильтром.
        4.    Содержание    каротина   рассчитывают     по   форму-
        0,00235 100 v1 v 3 h1
ле: Х                         ,
              v 2 Н h2
где Х – содержание каротина, мг/100 г растительного материала;
    v1 – объем ацетонового (или спиртового) экстракта пигментов в
мерном цилиндре, мл;
    v2 – объем ацетонового (или спиртового) экстракта, нанесенный на
бумагу, мл;
    v3 – объем раствора каротинов в петролейном эфире или бензине,
взятый для колориметрирования, мл;
    h1 – показания шкалы колориметра для стандартного раствора;
    h2 – показания шкалы колориметра для исследуемого раствора
(среднее из 5-6 определений);
                                                                 85