Организм и среда: факториальная экология. Воскресенская О.Л - 80 стр.

         3.2.1. Обнаружение тяжелых металлов в растениях
                     гистохимическим методом
     В работе используется способность тяжелых металлов давать
красное окрашивание при реакции с дитизоном:




       Дитизон обладает высокой чувствительностью к кадмию и свинцу
 и образует в присутствии исследуемых металлов нерастворимые соли –
 дитизонаты, окрашенные в красный цвет. Дитизон и дитизонаты прак-
 тически нерастворимы в нейтральных и кислых водных растворах. По-
 мимо кадмия и свинца дитизон может образовывать окрашенные ком-
 плексы с цинком, кобальтом, медью, хромом, железом, никелем и не-
 которыми другими металлами.
       Для обнаружения тяжелых металлов используют проростки куку-
рузы, у которых концентрации 10-3 М Pb(NO3)2 и 10-4 М Cd(NO3)2 ингибиру-
ют рост корня на 50%, для других проростков (горох, огурец, подсол-
нечник и т.д.) данные концентрации могут быть как ингибирующими
рост корня на 50%, так и летальными. С помощью реакции с дитизо-
ном можно исследовать любые растения и их органы из неблагоприят-
ных и благоприятных районов города, растения водоемов, а также со-
держание тяжелых металлов в сточных водах, осадках и т.д.
       ЗАДАЧА: Познакомиться с гистохимическим методом выяв-
ления Cd и Pb в растениях и изучить распределение тяжелых металлов
в проростках кукурузы.
       Х од р а бот ы
       Работа складывается из двух этапов: 1) выращивание проростков
на растворах солей; 2) приготовление срезов и их микроскопирование.
      1. Зерновки кукурузы, предварительно обработанные в течение
10-20 мин слабым раствором формалина или перманганата калия, рас-
кладывают по 7 штук в чашки Петри на фильтровальную бумагу и на-
ливают в каждую чашку по 15 мл дистиллированной воды (контроль),
раствор Pb(NO3)2 в концентрации 10-3М и раствор Cd(NO3)2 в концен-
трации 10-4М.
      Чашки Петри выдерживают в термостате при температуре 26 °С в
течение семи дней, затем проводят измерения длины главного корня,
колеоптиля и зоны боковых корней проростков. Для каждого варианта
рассчитывают средние величины и процент к контролю (табл. 34).
      2. Для определения локализации Cd и Pb в растениях готовят серии
поперечных срезов корня на разных расстояниях от апекса, а также срезы

                                   80