Практикум по биологии почв. Зенова Г.М - 31 стр.

     Засеянные почвенной суспензией чашки просматривают, начиная с 3-5
сут. Окончательный учет производят на 6-10-ый день на средах с целлюлозой, с
лигнином – через 2-3 недели, на голодном и почвенном агаре – через 3-4
недели.
     Для дифференцированного учета спор и мицелия применяют метод
мембранных фильтров. В колбу вносят навеску почвы 1г и доливают водой до
100 мл. Для полной десорбции микроорганизмов в суспензию добавляют
поверхностно-активное вещество Твин-60. Суспензию обрабатывают на
ультразвуковом дезинтеграторе УЗДН-1 (22 кГц, 0,44 А, 2 мин), вносят в нее
смесь Са(ОН)2 и MgCO3 для коагуляции почвенных частиц, взбалтывают 2 мин,
переносят в мерный цилиндр на 100 мл. После 5-минутного отстаивания 5 мл
суспензии   профильтровывают     через мембранный     фильтр.   Мембранные
фильтры (диаметр пор 0,4 мкм) предварительно выдерживают сутки в 0,5%-ном
растворе диазинового зеленого для тушения собственной люминесценции,
отмывают в воде, высушивают. После фильтрации мембранные фильтры
высушивают, окрашивают в 0,001%-ным раствором калкофлора 1—2 мин,
снова высушивают и просматривают под люминесцентным             микроскопом
Люмам И-3 (объектив 90х). Споры и гифы грибов имеют ярко-зеленое
свечение.
      Количественный учет грибов в почве и расчет их биомассы производят с
помощью люминесцентного микроскопа (Методы почвенной микробиологии
и биохимии,1991).
     Методы наблюдения за почвенными грибами в чистых культурах.
Культуральные признаки грибов описывают на плотных питательных средах в
чашках Петри. Используют сусло-агар и синтетические среды. За культурой
наблюдают в течение нескольких дней и даже двух недель с интервалом 3—4
дня. При описании культуральных признаков грибов отмечают скорость роста
колоний (быстро растущие или медленно растущие), внешний вид колонии,
текстуру    колонии   (бархатистая,   пушистая,   шерстистая,   шероховатая,
войлочная), окраску колонии, окраску субстратного и воздушного мицелия,

                                      30