Практикум по биологии почв. Зенова Г.М - 54 стр.

UptoLike

Рубрика: 

53
тонкой иглы. При наличии мацерации клетки отделяются друг от друга и срез
картофеля размягчается. Мацерация свидетельствует о присутствии в
культуральной жидкости пектолитических ферментов, в частности
протопектиназы. Присутствие пектолитических ферментов в культурах
микроорганизмов можно выявить и по наличию зон осветления и разложения
пектина в местах инокуляции микроорганизмов на плотных средах, покрытых
слоем 2%-ного раствора пектина. В качестве плотной питательной среды может
быть использован почвенный агар.
Обнаружение пектинэстеразы проводят с помощью посева на
специальную среду следующего состава: картофельный бульон— 1000 мл;
пектин—7 г; дрожжевой автолизат—5 мл; тиогликолевая кислота—1 мл; 0,5%-
ный бромтимоловый синий—1 мл. Среду стерилизуют при 0,5 атм 30 мин.
После стерилизации рН среды доводят до 7,27,5 стерильным 10%-ным
раствором NaOH. Инкубацию посевов производят при 37°. На 1-, 2-, 3- и 4-е
сутки роста определяют изменение значения рН по изменению окраски инди-
катора.
Наличие полигалактуроназы в культурах микроорганизмов выявляют,
высевая культуры на среду следующего состава: картофельный бульон—1000
мл; пектин—13 г; дрожжевой автолизат—5 мл; тиогликолевая кислота—0,5 мл;
0,004%-ный нейтральный красный 1 мл. Последующие операции
аналогичны определению пектинэстеразы.
Аэробное разложение целлюлозы. Аэробные целлюлозоразлагающие
микроорганизмы наиболее полно выявляются методом . почвенных пластинок.
Почву обогащают соединениями калия и азота (2 мл 1,5%-ного раствора KNO
3
на 5060 г почвы). Обогащенную навеску размешивают, увлажняют и
помещают в чашку Петри, на дно которой предварительно кладут стерильные
обеззоленные фильтры или фильтровальную бумагу. На поверхность
почвенной пластинки также накладывают кружок фильтровальной бумаги и
плотно прижимают его к поверхности пластинки. Чашки с пластинками
инкубируют во влажной камере. Срок инкубации варьирует в зависимости от
тонкой иглы. При наличии мацерации клетки отделяются друг от друга и срез
картофеля   размягчается.    Мацерация        свидетельствует    о    присутствии       в
культуральной    жидкости         пектолитических     ферментов,          в     частности
протопектиназы. Присутствие пектолитических                ферментов в культурах
микроорганизмов можно выявить и по наличию зон осветления и разложения
пектина в местах инокуляции микроорганизмов на плотных средах, покрытых
слоем 2%-ного раствора пектина. В качестве плотной питательной среды может
быть использован почвенный агар.
     Обнаружение     пектинэстеразы       проводят     с     помощью          посева   на
специальную среду следующего состава: картофельный бульон— 1000 мл;
пектин—7 г; дрожжевой автолизат—5 мл; тиогликолевая кислота—1 мл; 0,5%-
ный бромтимоловый синий—1 мл. Среду стерилизуют при 0,5 атм 30 мин.
После стерилизации рН среды доводят до 7,2—7,5 стерильным 10%-ным
раствором NaOH. Инкубацию посевов производят при 37°. На 1-, 2-, 3- и 4-е
сутки роста определяют изменение значения рН по изменению окраски инди-
катора.
     Наличие полигалактуроназы в культурах микроорганизмов выявляют,
высевая культуры на среду следующего состава: картофельный бульон—1000
мл; пектин—13 г; дрожжевой автолизат—5 мл; тиогликолевая кислота—0,5 мл;
0,004%-ный нейтральный        красный     —     1   мл. Последующие             операции
аналогичны определению пектинэстеразы.
     Аэробное разложение целлюлозы. Аэробные целлюлозоразлагающие
микроорганизмы наиболее полно выявляются методом . почвенных пластинок.
Почву обогащают соединениями калия и азота (2 мл 1,5%-ного раствора KNO3
на 50—60 г почвы). Обогащенную навеску размешивают, увлажняют и
помещают в чашку Петри, на дно которой предварительно кладут стерильные
обеззоленные    фильтры     или     фильтровальную     бумагу.       На       поверхность
почвенной пластинки также накладывают кружок фильтровальной бумаги и
плотно прижимают его к поверхности пластинки. Чашки с пластинками
инкубируют во влажной камере. Срок инкубации варьирует в зависимости от

                                         53