Микробиология с основами вирусологии. Алёхина Г.П. - 8 стр.

UptoLike

Составители: 

Рубрика: 

контрастная, аноптральная, люминесцентная и др.) и электронная микроскопия.
Выбор метода определяется целями, стоящими перед исследователем.
В основе световой микроскопии лежат различные свойства света. Совре-
менные световые микроскопы представляют собой довольно сложные приборы,
совершенствуемые в течение 400 лет с момента создания первого прототипа
микроскопа. Современный биологический световой микроскоп состоит из сле-
дующих основных элементов: штатива, состоящего из массивного основания
(башмака) и тубусодер-жателя, на котором смонтирована механическая система
грубой и тонкой настройки, револьвер с 3-4 сменными объективами, предмет-
ный столик с конденсором и диафрагмой и под ним светонаправ-ляющее зерка-
ло, концентрирующее естественный или искусственный свет на объект иссле-
дования, находящийся на предметном столике. Тубусодержатель микроскопа
заканчивается головкой, на которой крепится монокулярный или бинокулярный
тубус с окуляром или окулярами. Предметный столик имеет приспособление
для крепления предметного стекла с препаратом и механизма для его переме-
щения.
Люминесцентная микроскопия
Метод основан на способности некоторых веществ светиться под дейст-
вием коротковолновых лучей света. При этом длина волны излучаемого при
люминесценции света всегда будет больше, чем длина волны света, возбуж-
дающего люминесценцию. Так, если освещать объект синим светом, он будет
испускать лучи красного, оранжевого, желтого и зеленого цвета. Препараты для
люминесцентной микроскопии окрашивают специальными светящимися лю-
минесцентными красителямифлуорохромами (акридиновый оранжевый,
изотиоцианат флуоресцеина и др.). Лучи света от сильного источника (обычно
ртутной лампы сверхвысокого давления) пропускают через сине-фиолетовый
светофильтр. Под действием этого коротковолнового излучения окрашенные
флуорохромом клетки или бактерии начинают светиться красным или зеленым
светом. Для того, чтобы синий свет, вызвавший люминесценцию, не мешал на-
блюдению, над окуляром ставят запирающий желтый светофильтр, задержи-
вающий синие, но пропускающий желтые, красные и зеленые лучи. В результа-
те при наблюдении в люминесцентном микроскопе на темном фоне видны бу-
дут клетки или бактерии, светящиеся желтым, зеленым или красным цветом.
Например, при окраске акридиновым оранжевым ДНК клетки (ядерное вещест-
во) будет светиться ярко-зеленым цветом. Метод люминесцентной микроско-
пии позволяет изучать живые нефиксированные бактерии, окрашенные сильно
разведенными флуорохромами, не причиняющими вреда микробным клеткам.
По характеру свечения могут быть дифференцированы отдельные химические
вещества, входящие в состав микробной клетки. Метод с успехом может быть
использован для ускоренной диагностики ряда заболеваний .
Фазовоконтрастная микроскопия
Обыкновенные окрашенные препараты поглощают часть проходящего
через них света, в результате чего амплитуда световых волн снижается, и час-
тицы препарата выглядят темнее фона. При прохождении света через неокра-
шенный препарат амплитуда световых волн не меняется, происходит лишь из-
8
контрастная, аноптральная, люминесцентная и др.) и электронная микроскопия.
Выбор метода определяется целями, стоящими перед исследователем.
      В основе световой микроскопии лежат различные свойства света. Совре-
менные световые микроскопы представляют собой довольно сложные приборы,
совершенствуемые в течение 400 лет с момента создания первого прототипа
микроскопа. Современный биологический световой микроскоп состоит из сле-
дующих основных элементов: штатива, состоящего из массивного основания
(башмака) и тубусодер-жателя, на котором смонтирована механическая система
грубой и тонкой настройки, револьвер с 3-4 сменными объективами, предмет-
ный столик с конденсором и диафрагмой и под ним светонаправ-ляющее зерка-
ло, концентрирующее естественный или искусственный свет на объект иссле-
дования, находящийся на предметном столике. Тубусодержатель микроскопа
заканчивается головкой, на которой крепится монокулярный или бинокулярный
тубус с окуляром или окулярами. Предметный столик имеет приспособление
для крепления предметного стекла с препаратом и механизма для его переме-
щения.
      Люминесцентная микроскопия
      Метод основан на способности некоторых веществ светиться под дейст-
вием коротковолновых лучей света. При этом длина волны излучаемого при
люминесценции света всегда будет больше, чем длина волны света, возбуж-
дающего люминесценцию. Так, если освещать объект синим светом, он будет
испускать лучи красного, оранжевого, желтого и зеленого цвета. Препараты для
люминесцентной микроскопии окрашивают специальными светящимися лю-
минесцентными красителями — флуорохромами (акридиновый оранжевый,
изотиоцианат флуоресцеина и др.). Лучи света от сильного источника (обычно
ртутной лампы сверхвысокого давления) пропускают через сине-фиолетовый
светофильтр. Под действием этого коротковолнового излучения окрашенные
флуорохромом клетки или бактерии начинают светиться красным или зеленым
светом. Для того, чтобы синий свет, вызвавший люминесценцию, не мешал на-
блюдению, над окуляром ставят запирающий желтый светофильтр, задержи-
вающий синие, но пропускающий желтые, красные и зеленые лучи. В результа-
те при наблюдении в люминесцентном микроскопе на темном фоне видны бу-
дут клетки или бактерии, светящиеся желтым, зеленым или красным цветом.
Например, при окраске акридиновым оранжевым ДНК клетки (ядерное вещест-
во) будет светиться ярко-зеленым цветом. Метод люминесцентной микроско-
пии позволяет изучать живые нефиксированные бактерии, окрашенные сильно
разведенными флуорохромами, не причиняющими вреда микробным клеткам.
По характеру свечения могут быть дифференцированы отдельные химические
вещества, входящие в состав микробной клетки. Метод с успехом может быть
использован для ускоренной диагностики ряда заболеваний .
      Фазовоконтрастная микроскопия
      Обыкновенные окрашенные препараты поглощают часть проходящего
через них света, в результате чего амплитуда световых волн снижается, и час-
тицы препарата выглядят темнее фона. При прохождении света через неокра-
шенный препарат амплитуда световых волн не меняется, происходит лишь из-
8