Микробиология с основами вирусологии. Алёхина Г.П. - 9 стр.

менение фазы световых волн, прошедших через частицы препарата. Однако че-
ловеческий глаз улавливать это изменение фазы света не способен, поэтому не-
окрашенный препарат при правильной установке освещения в микроскопе бу-
дет невидим.
      Фазовоконтрастное устройство позволяет превратить изменение фазы лу-
чей, прошедших через частицы неокрашенного препарата, в изменения ампли-
туды, воспринимаемые человеческим глазом, и, таким образом, позволяет сде-
лать неокрашенные препараты отчетливо видимыми.
      Приспособление для фазовоконтрастной микроскопии включает в себя
конденсор с набором кольцевых диафрагм, обеспечивающих освещение препа-
рата полным конусом света, и фазовоконтраст-ные объективы, которые отли-
чаются от обычных тем, что в их главном фокусе располагается полупрозрач-
ная'фазовая пластинка в виде кольца, вызывающая сдвиг фазы проходящего че-
рез нее света. Установку освещения проводят так, чтобы весь свет, прошедший
через кольцевидную диафрагму конденсора, в дальнейшем прошел через рас-
положенное в объективе фазовое кольцо.
      При рассмотрении препарата весь свет, прошедший через участки препа-
рата, в которых нет каких-либо объектов, пройдет через фазовое кольцо и даст
светлое изображение фона. Свет, прошедший через имеющиеся в препарате
частицы, например бактериальные клетки, получит некоторое изменение фазы
и, кроме того, разделится на два луча — недифрагированный и дифрагирован-
ный. Недифрагированные лучи, пройдя в дальнейшем через кольцевидную фа-
зовую пластинку в объективе, получат дополнительный сдвиг фазы. Дифраги-
рованные лучи пройдут мимо фазовой пластинки, и их фаза не изменится. В
плоскости полевой диафрагмы окуляра произойдет интерференция (наложение)
дифрагированного и недифрагированного лучей, а так как эти лучи идут в раз-
ных фазах, произойдет их взаимное частичное гашение и уменьшение амплиту-
ды. Благодаря этому микробные клетки будут выглядеть темными на светлом
фоне.
      Существенными недостатками фаздвоконтрастной микроскопии являют-
ся слабая контрастность получаемых изображений и наличие светящихся орео-
лов вокруг объектов. Фазовоконтрастная микроскопия не увеличивает разре-
шающей способности микроскопа, но помогает выявить детали структуры жи-
вых бактерий, стадии их развития, изменения в них под действием различных
агентов (антибиотики, химические вещества и т. д.).
      Аноптральная микроскопия (амплитудноконтрастная, фазовотемно-
польная)
      Аноптральная микроскопия — разновидность фазовоконтрастной микро-
скопии, при которой применяют объективы со специальными пластинками, на-
несенными на одну из линз в виде затемненного кольца. Принцип аноптраль-
ной микроскопии тот же, что и фазовоконтрастной, но первая обладает боль-
шей разрешающей способностью при микроскопировании объектов, вызы-
вающих незначительный фазовый сдвиг, и открывает новые возможности ис-
пользования обычного светового микроскопа для прижизненного исследования
бактерий, простейших и т. д.
                                                                           9