Микробиология с основами вирусологии. Алёхина Г.П. - 10 стр.

UptoLike

Составители: 

Рубрика: 

Широкое центральное отверстие в слое копоти или меди, нанесенных на
линзу объектива, является как бы люком, выпускающим из объектива главную
массу дифрагированного света, в то время как широкий темный слой кольца,
покрывающий остальную поверхность линзы, играет роль ловушки для нежела-
тельного периферического дифрагированного света. За счет этого в значитель-
ной степени устраняется ореол вокруг исследуемого объекта, фон поля зрения
имеет коричневато-серый цвет, а сами объекты имеют различные оттенки от
светло-коричневого до белого.
Интерференционная микроскопия
Интерференционная микроскопия решает те же задачи, что и фазовокон-
трастная, но если последняя позволяет наблюдать лишь контуры объектов ис-
следования, то с помощью интерференционной микроскопии можно изучать
детали прозрачного объекта и проводить их количественный анализ. Это дости-
гается благодаря раздвоению луча света в микроскопе: один из лучей проходит
через частицу объекта, а другой мимо нее. В окуляре микроскопа оба луча со-
единяются и интерферируют между собой. Разность возникающих фаз можно
измерить, определив таким образом массу различных клеточных структур. По-
следовательное измерение разности фаз света с известными показателями пре-
ломления дает возможность определять толщину живых объектов, концентра-
цию в них воды и сухого вещества и т. д. На основании данных интерференци-
онной микроскопии можно косвенно судить о проницаемости мембран, актив-
ности ферментов, клеточном метаболизме объектов исследования.
Поляризационная микроскопия
Поляризационная микроскопия позволяет изучать объекты исследования
в свете, образованном двумя лучами, поляризованными во взаимно перпенди-
кулярных плоскостях, т. е. в поляризованном свете. Для этого используют
пленчатые поляроиды или призмы Николя, которые помещают в микроскопе
между источником света и препаратом. Поляризация меняется при прохожде-
нии лучей света через различные структурные компоненты клеток и тканей,
свойства которых неоднородны, или при отражении от них. В оптически изо-
тропных структурах скорость распространения поляризованного света не зави-
сит от плоскости поляризации, в анизотропных структурах она меняется в зави-
симости от направления света по продольной или поперечной оси объекта. Ес-
ли показатель преломления света вдоль структуры больше, чем в поперечном
направлении, возникает положительное двойное лучепреломление, при обрат-
ных взаимоотношенияхотрицательное двойное лучепреломление. Многие
биологические объекты имеют строгую молекулярную ориентацию, являются
анизотропными и обладают положительным двойным преломлением света.
Темнопольная микроскопия
При микроскопии по методу темного поля препарат освещается сбоку ко-
сыми пучками лучей, не попадающими в объектив. В объектив попадают лишь
лучи, которые отклоняются частицами препарата в результате отражения, пре-
ломления или дифракции. В силу этого микробные клетки и другие частицы
представляются ярко светящимися на черном фоне (картина напоминает мер-
цающее звездное небо).
10
      Широкое центральное отверстие в слое копоти или меди, нанесенных на
линзу объектива, является как бы люком, выпускающим из объектива главную
массу дифрагированного света, в то время как широкий темный слой кольца,
покрывающий остальную поверхность линзы, играет роль ловушки для нежела-
тельного периферического дифрагированного света. За счет этого в значитель-
ной степени устраняется ореол вокруг исследуемого объекта, фон поля зрения
имеет коричневато-серый цвет, а сами объекты имеют различные оттенки от
светло-коричневого до белого.
      Интерференционная микроскопия
      Интерференционная микроскопия решает те же задачи, что и фазовокон-
трастная, но если последняя позволяет наблюдать лишь контуры объектов ис-
следования, то с помощью интерференционной микроскопии можно изучать
детали прозрачного объекта и проводить их количественный анализ. Это дости-
гается благодаря раздвоению луча света в микроскопе: один из лучей проходит
через частицу объекта, а другой мимо нее. В окуляре микроскопа оба луча со-
единяются и интерферируют между собой. Разность возникающих фаз можно
измерить, определив таким образом массу различных клеточных структур. По-
следовательное измерение разности фаз света с известными показателями пре-
ломления дает возможность определять толщину живых объектов, концентра-
цию в них воды и сухого вещества и т. д. На основании данных интерференци-
онной микроскопии можно косвенно судить о проницаемости мембран, актив-
ности ферментов, клеточном метаболизме объектов исследования.
      Поляризационная микроскопия
      Поляризационная микроскопия позволяет изучать объекты исследования
в свете, образованном двумя лучами, поляризованными во взаимно перпенди-
кулярных плоскостях, т. е. в поляризованном свете. Для этого используют
пленчатые поляроиды или призмы Николя, которые помещают в микроскопе
между источником света и препаратом. Поляризация меняется при прохожде-
нии лучей света через различные структурные компоненты клеток и тканей,
свойства которых неоднородны, или при отражении от них. В оптически изо-
тропных структурах скорость распространения поляризованного света не зави-
сит от плоскости поляризации, в анизотропных структурах она меняется в зави-
симости от направления света по продольной или поперечной оси объекта. Ес-
ли показатель преломления света вдоль структуры больше, чем в поперечном
направлении, возникает положительное двойное лучепреломление, при обрат-
ных взаимоотношениях — отрицательное двойное лучепреломление. Многие
биологические объекты имеют строгую молекулярную ориентацию, являются
анизотропными и обладают положительным двойным преломлением света.
      Темнопольная микроскопия
      При микроскопии по методу темного поля препарат освещается сбоку ко-
сыми пучками лучей, не попадающими в объектив. В объектив попадают лишь
лучи, которые отклоняются частицами препарата в результате отражения, пре-
ломления или дифракции. В силу этого микробные клетки и другие частицы
представляются ярко светящимися на черном фоне (картина напоминает мер-
цающее звездное небо).
10