Микробиология с основами вирусологии. Алёхина Г.П. - 11 стр.

UptoLike

Составители: 

Рубрика: 

Для микроскопии в темном поле используют специальный конденсор
(параболоид-конденсор или кардиоид-конденсор) и обычные объективы. Так
как апертура иммерсионного объектива больше, чем апертура конденсора тем-
ного поля, внутрь иммерсионного объектива вставляется специальная трубча-
тая диафрагма, снижающая его апертуру.
Этот метод микроскопии удобен при изучении живых бактерий, спирохет
и их подвижности.
Электронная микроскопия
Для изучения структуры клеток на субклеточном и молекулярном уров-
нях, а также для изучения вирусов используют электронную микроскопию.
Ценность электронной микроскопии заключается в ее способности разрешать
объекты, не разрешаемые оптическим микроскопом в видимом или ультрафио-
летовом свете. Малая длина волны электронов, которая уменьшается в прямой
зависимости от подаваемого ускоряющего напряжения, позволяет разрешать, т.
е. различать как отдельные объекты, отстоящие друг от друга всего на 2А (0,2
нм или 0,0002 мкм) или даже меньше, в то время как предел разрешения свето-
вой оптики лежит вблизи 0,2 мкм (он зависит от длины волны используемого
света). Электронная микроскопия, при которой изображение получают благо-
даря прохождению (просвечиванию) электронов через образец, называется про-
свечивающей (трансмиссивной). При сканирующей (растровой), или туннель-
ной электронной микроскопии пучок электронов быстро сканирует (просмат-
ривает) поверхность образца, вызывая излучение (отражение), которое посред-
ством катодно-лучевой трубки формирует изображение на светящемся экране
микроскопа по аналогии с формированием телевизионного изображения.
Принципиальная оптическая схема электронного микроскопа аналогична
схеме светового, в котором все оптические элементы заменены соответствую-
щими электрическими: источник светаисточником электронов, стеклянные
линзылинзами электромагнитными. В электронных микроскопах просвечи-
вающего типа различают три системы: электронно-оптическую, вакуумную,
электропитания. Фотографирование изображений при всех видах исследований
проводится на фотопластинки или фотопленку. Источником электронов являет-
ся электронная пушка, состоящая из V-образного вольфрамового термокатода,
который при нагревании до 2900 °С при подаче постоянного напряжения до 100
кВ в результате термоэмиссии испускает свободные электроны, ускоряемые за-
тем электростатическим полем, создаваемым между фокусирующим электро-
дом и анодом. Электронный пучок затем формируется с помощью конденсор-
ных линз и направляется на исследуемый объект. Электроны, проходя сквозь
объект, за счет его разной толщины и электроноплотности отклоняются под
различными углами и попадают в объективную линзу, которая формирует пер-
вое полезное увеличение объекта.
После объективной линзы электроны попадают в промежуточную линзу,
которая предназначена для плавного изменения увеличения микроскопа и по-
лучения дифракции с участков исследуемого образца. Проекционная линза соз-
дает конечное увеличенное изображение объекта, которое направляется на
флуоресцирующий экран. Благодаря взаимодействию быстрых электронов с
11
      Для микроскопии в темном поле используют специальный конденсор
(параболоид-конденсор или кардиоид-конденсор) и обычные объективы. Так
как апертура иммерсионного объектива больше, чем апертура конденсора тем-
ного поля, внутрь иммерсионного объектива вставляется специальная трубча-
тая диафрагма, снижающая его апертуру.
      Этот метод микроскопии удобен при изучении живых бактерий, спирохет
и их подвижности.
      Электронная микроскопия
      Для изучения структуры клеток на субклеточном и молекулярном уров-
нях, а также для изучения вирусов используют электронную микроскопию.
Ценность электронной микроскопии заключается в ее способности разрешать
объекты, не разрешаемые оптическим микроскопом в видимом или ультрафио-
летовом свете. Малая длина волны электронов, которая уменьшается в прямой
зависимости от подаваемого ускоряющего напряжения, позволяет разрешать, т.
е. различать как отдельные объекты, отстоящие друг от друга всего на 2А (0,2
нм или 0,0002 мкм) или даже меньше, в то время как предел разрешения свето-
вой оптики лежит вблизи 0,2 мкм (он зависит от длины волны используемого
света). Электронная микроскопия, при которой изображение получают благо-
даря прохождению (просвечиванию) электронов через образец, называется про-
свечивающей (трансмиссивной). При сканирующей (растровой), или туннель-
ной электронной микроскопии пучок электронов быстро сканирует (просмат-
ривает) поверхность образца, вызывая излучение (отражение), которое посред-
ством катодно-лучевой трубки формирует изображение на светящемся экране
микроскопа по аналогии с формированием телевизионного изображения.
      Принципиальная оптическая схема электронного микроскопа аналогична
схеме светового, в котором все оптические элементы заменены соответствую-
щими электрическими: источник света — источником электронов, стеклянные
линзы — линзами электромагнитными. В электронных микроскопах просвечи-
вающего типа различают три системы: электронно-оптическую, вакуумную,
электропитания. Фотографирование изображений при всех видах исследований
проводится на фотопластинки или фотопленку. Источником электронов являет-
ся электронная пушка, состоящая из V-образного вольфрамового термокатода,
который при нагревании до 2900 °С при подаче постоянного напряжения до 100
кВ в результате термоэмиссии испускает свободные электроны, ускоряемые за-
тем электростатическим полем, создаваемым между фокусирующим электро-
дом и анодом. Электронный пучок затем формируется с помощью конденсор-
ных линз и направляется на исследуемый объект. Электроны, проходя сквозь
объект, за счет его разной толщины и электроноплотности отклоняются под
различными углами и попадают в объективную линзу, которая формирует пер-
вое полезное увеличение объекта.
      После объективной линзы электроны попадают в промежуточную линзу,
которая предназначена для плавного изменения увеличения микроскопа и по-
лучения дифракции с участков исследуемого образца. Проекционная линза соз-
дает конечное увеличенное изображение объекта, которое направляется на
флуоресцирующий экран. Благодаря взаимодействию быстрых электронов с
                                                                          11