Органическая химия. Аюрова О.Ж. - 20 стр.

UptoLike

Составители: 

Адсорбент (окись алюминия) на стеклянной пластин-
ке выравнивается стеклянной палочкой. Слой адсорбента
должен быть гладким, без пор и шероховатостей. На тонкий
слой адсорбента на стеклянной пластинке, наносятся рас-
творы испытуемого вещества при помощи капилляра в виде
точек на стартовую линию, отстоящую от края пластины на
1см (расстояние между точками с пробами веществ не
меньше 1,5см). Вещества наносят осторожно, чтобы не на-
рушить слой адсорбента. Пластинку погружают в раствори-
тель, находящийся в чашке Петри, под углом 10-20 град, не
более чем 0.5см. Растворитель, продвигаясь по адсорбенту,
разделяет смесь вещества за 30-40 мин. Когда растворитель
продвинется на 9-10 см, пластину вынимают из чашки, от-
мечают линию фронта, сушат на воздухе 5-10 мин. Затем ее
опрыскивают диазотированной солью сульфаниловой ки-
слоты в 10% растворе соды. Опрыскивание производят ос-
торожно из пульверизатора с помощью лаборанта. После
опрыскивания появляется окрашивание в виде нескольких
пятен. Исследуемые вещества проявляются в виде отдель-
ных пятен между линией старта (место нанесения вещества)
и линией финиша (крайняя верхняя граница, до которой про-
двинулся растворитель.)
Положение исследуемых ве-
ществ, находящихся в виде ок-
рашенных пятен между линией
старта и линией фронта, харак-
теризуется физической кон-
стантой R
f
. Величину R
f
(коэф-
фициент удерживания или рас-
пределения) вычисляют по
уравнению: R
f
= в/а,
где в - это расстояние от стартовой линии до центра
пятна, а - расстояние от стартовой линии до финиша. Вели-
чина R
f
характерна для соединения, обнаружение которого
ведется в строго определенных условиях и зависит от спосо-
ба работы адсорбента, растворителя количества нанесенного
вещества, длины пробега растворителя. Тонкослойная хро-
матография - очень удобный способ для разделения неболь-
ших количеств многокомпонентных смесей веществ. Пре-
имущества этого метода - быстрота и большая чувствитель-
ность (0,1-0,05 г вещества).
А, Б - чистые веществасвидетели»)
С - смесь веществ
Задание: Нарисовать хроматограмму, рассчитать R
f
каждого пятна и сделать вывод о компонентах смеси.
3.2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АМИНОКИСЛОТ
РАДИАЛЬНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ
Реактивы и посуда:
Смесь аминокислот
Чистые аминокислоты (аланин, аспарагиновая кислота, ва-
лин)
Растворитель (смесь бутанола, уксусной кислоты, воды -
БУВ) 4:1:5
Проявитель (0,5 % раствор нингидрина в ацетоне)
Хроматографическая бумага
Стеклянные капилляры 3 шт.
Чашки Петри 2 шт.
Простой карандаш
!!!работу выполнять аккуратно. Бумажную хромато-
грамму держать руками только за края. Пользоваться
только простым карандашом.
Хроматографическая камера состоит из двух чашек
Петри равного диаметра. В нижнюю из них помещают рас-
творитель - смесь БУВ (4:1:5). Из куска специальной фильт-
                                                              чина Rf характерна для соединения, обнаружение которого
       Адсорбент (окись алюминия) на стеклянной пластин-      ведется в строго определенных условиях и зависит от спосо-
ке выравнивается стеклянной палочкой. Слой адсорбента         ба работы адсорбента, растворителя количества нанесенного
должен быть гладким, без пор и шероховатостей. На тонкий      вещества, длины пробега растворителя. Тонкослойная хро-
слой адсорбента на стеклянной пластинке, наносятся рас-       матография - очень удобный способ для разделения неболь-
творы испытуемого вещества при помощи капилляра в виде        ших количеств многокомпонентных смесей веществ. Пре-
точек на стартовую линию, отстоящую от края пластины на       имущества этого метода - быстрота и большая чувствитель-
1см (расстояние между точками с пробами веществ не            ность (0,1-0,05 г вещества).
меньше 1,5см). Вещества наносят осторожно, чтобы не на-              А, Б - чистые вещества («свидетели»)
рушить слой адсорбента. Пластинку погружают в раствори-              С - смесь веществ
тель, находящийся в чашке Петри, под углом 10-20 град, не            Задание: Нарисовать хроматограмму, рассчитать Rf
более чем 0.5см. Растворитель, продвигаясь по адсорбенту,     каждого пятна и сделать вывод о компонентах смеси.
разделяет смесь вещества за 30-40 мин. Когда растворитель
продвинется на 9-10 см, пластину вынимают из чашки, от-                 3.2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АМИНОКИСЛОТ
мечают линию фронта, сушат на воздухе 5-10 мин. Затем ее                 РАДИАЛЬНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ
опрыскивают диазотированной солью сульфаниловой ки-
слоты в 10% растворе соды. Опрыскивание производят ос-        Реактивы и посуда:
торожно из пульверизатора с помощью лаборанта. После          Смесь аминокислот
опрыскивания появляется окрашивание в виде нескольких         Чистые аминокислоты (аланин, аспарагиновая кислота, ва-
пятен. Исследуемые вещества проявляются в виде отдель-        лин)
ных пятен между линией старта (место нанесения вещества)      Растворитель (смесь бутанола, уксусной кислоты, воды -
и линией финиша (крайняя верхняя граница, до которой про-     БУВ) 4:1:5
двинулся растворитель.)                                       Проявитель (0,5 % раствор нингидрина в ацетоне)
                             Положение исследуемых ве-        Хроматографическая бумага
                             ществ, находящихся в виде ок-    Стеклянные капилляры                             3 шт.
                             рашенных пятен между линией      Чашки Петри                                      2 шт.
                             старта и линией фронта, харак-   Простой карандаш
                             теризуется физической кон-
                             стантой Rf. Величину Rf (коэф-   !!! – работу выполнять аккуратно. Бумажную хромато-
                             фициент удерживания или рас-     грамму держать руками только за края. Пользоваться
                             пределения) вычисляют по         только простым карандашом.
                             уравнению: Rf = в/а,                    Хроматографическая камера состоит из двух чашек
       где в - это расстояние от стартовой линии до центра    Петри равного диаметра. В нижнюю из них помещают рас-
пятна, а - расстояние от стартовой линии до финиша. Вели-     творитель - смесь БУВ (4:1:5). Из куска специальной фильт-