Современные методы исследований в биохимии. Битуева А.В. - 24 стр.

UptoLike

Составители: 

Рубрика: 

В настоящее время все большую популярность
приобретают времяпролетные масс-анализаторы, в которых
заряженные частицы движутся в бесполевом пространстве. Ионы
из источника разгоняются электрическим полем, приобретая
достаточно большую кинетическую энергию, и вылетают в
бесполевое пространство. На входе в это пространство все ионы
имеют одинаковую кинетическую энергию, в зависимости от
массы будут двигаться с разными скоростями и в разное время до-
стигнут детектора, который расположен в конце трубы их
пролета. Измерив время пролета, можно посчитать массу
зарегистрированных ионов. Все процессы происходят за
миллионные доли секунды. Такой масс-спектрометр является
экспресс-анализатором. Другое его преимущество
возможность определять широкий диапазон масс, в том числе
очень больших органических молекул.
В масс-спектрометрах используют детекторы различных
типов, но наибольшее распространение получили электронные
умножители дискретного диодного и непрерывного диодного
типов. Оба этих устройства обеспечивают большое усиление (до
10
7
), что позволяет детектировать чрезвычайно малые ионные
токи.
4.1. Разновидности масс-спектрального анализа
Очевидно, что масс-спектрометрия с различными
источниками ионов и масс-анализаторами является
универсальным методом исследования, позволяющим
анализировать твердые, жидкие и газообразные вещества.
Масс-спектры неорганических веществ малолинейчатые и
простые по сравнению со спектрами органических веществ со
сложной структурой. При развитии метода за последние 20 лет
на первом этапе органическая масс-спектрометрия вытеснила
неорганическую, а теперь им первое место выходят масс-
спектральные исследования больших молекул. Особый интерес
вызывают природные соединения, пептиды и протеины,
полисахариды и полинуклеотиды (рис.6).
Для анализа жидкостей применяется
высокоэффективная масс-спектрометрия с формированием
ионного пучка в индуктивно-связанной плазме. Этот метод
сочетает низкие пределы обнаружения с хорошей
воспроизводимостью результатов.
Для анализа газовых или парогазовых сред применяют
масс-спектрометр если источником ионов служит электронная
пушка. Из-за мешающего влияния высокого парциального
давления основы прямой масс-спектральный анализ не дает
хороших результатов. Для достижения пределов обнаружения
примесей на уровне 10
-6
—10
-7
% предварительно концентрируют
примеси.
Для решения таких задач используют гибридные методы,
сочетающие масс-спектрометрию с выделением и
концентрированием:
газовая хроматография с масс-спектрометрией - метод
ГХ/МС, с помощью которого сложную трехсоткомпонентную
смесь можно разделить и идентифицировать компоненты, если
даже содержание компонентов в пробе составляет около 10
-12
г.
При хроматографии происходит предварительное разделение
исходной сложной смеси на относительно простые фракции.
жидкостная хроматография с масс-спектрометрией -
метод ЖХ/МС используется когда некоторые органические
соединения невозможно разделить с помощью газовой
хроматографии.
      В настоящее время все большую популярность                  вызывают природные соединения, пептиды и протеины,
приобретают времяпролетные масс-анализаторы, в которых            полисахариды и полинуклеотиды (рис.6).
заряженные частицы движутся в бесполевом пространстве. Ионы
из источника разгоняются электрическим полем, приобретая               Для       анализа       жидкостей         применяется
достаточно большую кинетическую энергию, и вылетают в             высокоэффективная масс-спектрометрия с формированием
бесполевое пространство. На входе в это пространство все ионы     ионного пучка в индуктивно-связанной плазме. Этот метод
имеют одинаковую кинетическую энергию, в зависимости от           сочетает низкие пределы обнаружения с хорошей
массы будут двигаться с разными скоростями и в разное время до-   воспроизводимостью результатов.
стигнут детектора, который расположен в конце трубы их                 Для анализа газовых или парогазовых сред применяют
пролета. Измерив время пролета, можно посчитать массу             масс-спектрометр если источником ионов служит электронная
зарегистрированных ионов. Все процессы происходят за              пушка. Из-за мешающего влияния высокого парциального
миллионные доли секунды. Такой масс-спектрометр является          давления основы прямой масс-спектральный анализ не дает
экспресс-анализатором. Другое его преимущество —                  хороших результатов. Для достижения пределов обнаружения
возможность определять широкий диапазон масс, в том числе         примесей на уровне 10-6—10-7% предварительно концентрируют
очень больших органических молекул.                               примеси.
      В масс-спектрометрах используют детекторы различных
типов, но наибольшее распространение получили электронные              Для решения таких задач используют гибридные методы,
умножители дискретного диодного и непрерывного диодного           сочетающие      масс-спектрометрию   с    выделением       и
типов. Оба этих устройства обеспечивают большое усиление (до      концентрированием:
107), что позволяет детектировать чрезвычайно малые ионные              газовая хроматография с масс-спектрометрией - метод
токи.                                                             ГХ/МС, с помощью которого сложную трехсоткомпонентную
                                                                  смесь можно разделить и идентифицировать компоненты, если
           4.1. Разновидности масс-спектрального анализа          даже содержание компонентов в пробе составляет около 10-12 г.
                                                                  При хроматографии происходит предварительное разделение
     Очевидно, что масс-спектрометрия с различными                исходной сложной смеси на относительно простые фракции.
источниками    ионов    и    масс-анализаторами    является            жидкостная хроматография с масс-спектрометрией -
универсальным     методом    исследования,    позволяющим         метод ЖХ/МС используется когда некоторые органические
анализировать твердые, жидкие и газообразные вещества.            соединения невозможно разделить с помощью газовой
Масс-спектры неорганических веществ малолинейчатые и              хроматографии.
простые по сравнению со спектрами органических веществ со
сложной структурой. При развитии метода за последние 20 лет
на первом этапе органическая масс-спектрометрия вытеснила
неорганическую, а теперь им первое место выходят масс-
спектральные исследования больших молекул. Особый интерес