Современные методы исследований в биохимии. Битуева А.В. - 25 стр.

a.i.                                                                                                                                  Рис. 6. Масс-спектограммы биорегулятора в диапозоне
18000
                                                                                                                                 молекулярных масс 1474 - 4211 Да (смыв 80%
                                                                                                                                 ацетонитрилом 0,1% ТФУ)
16000

                                                                                                                                       Масс-спектры фракций (L1 и L2) пептидного
14000
                                                                                                                                 биорегулятора АФЛ были получены на МАЛДИ-
12000                                                                                                                            времяпролетном масс-спектрометре Ultraflex BRUKER
10000
                                                                                                                                 (Германия), оснащенном УФ лазером (337 нм). Масс-спектры
                                                                                                                                 получены в режиме положительных ионов с использованием
8000
                                                                                                                                 рефлектрона; точность измеренных масс – 0.02 % (внешняя
6000                                                                                                                             калибровка).
4000
                                                                                                                                      тандемная масс-спектрометрия (МС/МС), когда масс-
2000                                                                                                                             анализаторы выстраиваются друг за другом. При анализе
   0
                                                                                                                                 сложной органической молекулы ее разрывают на фрагменты и
           1000    1500      2000     2500      3000     3500        4000    4500      5000      5500     6000    6500    m/z
                                                                                                                                 выделяют в первом масс-анализаторе те, которые представляют
                                                                                                                                 интерес. Во втором масс-анализаторе эти фрагменты разбивают
            /H=/Marina/07_12_04/Bitueva_L_gf1/0_M1/1/1SRef/pdata/1    Administrator    Fri Dec 10 11:25:01 2004


           L1
                                                                                                                                 на более мелкие и сортируют по массам. Однако
a.i.
                                                                                                                                 последовательных масс-анализаторов иногда недостаточно для
                                                                                                                                 того, чтобы расшифровать структуру молекул. В этом случае
25000
                                                                                                                                 используют ионные ловушки, с помощью которых можно
                                                                                                                                 удерживать представляющие интерес ионы, а остальные выбро-
                                                                                                                                 сить из нее. Оставшиеся в ловушке ионы можно подвергнуть де-
                                                                                                                                 струкции (управляемая фрагментация), зарегистрировать их,
20000




                                                                                                                                 оставить в ловушке те, которые представляют интерес,
15000                                                                                                                            остальные выбросить и т.д.

10000

                                                                                                                                                   5. Методы ДНК-диагностики
 5000

                                                                                                                                      Информация о всем многообразии свойств организма
                                                                                                                                 заключена в его генетическом материале. Сегмент ДНК,
       0

           1000     1500     2000      2500     3000      3500       4000     4500      5000      5500     6000    6500    m/z
                                                                                                                                 детерминирующий определенный биологический признак,
            /H=/Marina/07 12 04/Bitueva L gf2/0 M2/1/1SRef/pdata/1     Administrator   Fri Dec 10 11:36:31 2004
                                                                                                                                 имеет строго определенную нуклеотидную последова-
           L2