Современные методы исследований в биохимии. Битуева А.В - 9 стр.

       Концентрацию ретинолацетата в данном растворе             чтобы оптическая плотность полученного раствора была бы
      3
(мг/см ) рассчитывают по формуле:                                более 0,2, но менее, чем 0,8.
            5C                                                          Если же оптическая плотность исходного раствора
       C = CO                                                    менее 0.2, то его готовят заново, увеличивая навеску
              100
       где СCO - концентрация стандартного образца               препарата.
ретинолацетата, указанная в .свидетельстве на СО (мг/см3)               Срок хранения 1 месяц при температуре 3-100С.
       Срок хранения раствора - 3 месяца в холодильнике.                4.6.3.      Приготовление     рабочих      растворов
       4.6.2.     Приготовление      основного        раствора   ретинолацетата. Рабочие растворы с концентрациями 0.2 - 2.0
ретинолацетата из фармакопейных препаратов.                      мкг/см3 готовят из основного разбавлением этиловым
       Для приготовления исходного раствора ретинолацетата       спиртом.
можно      также     использовать     аптечные      препараты           Растворы готовятся непосредственно перед началом
ретинолацетата, растворенного в масле. Лекарственную форму       работы
(желатиновую капсулу) разрезают, помещают в стакан                      4.7. 1 Приготовление исходного раствора ретинол-
вместимостью 50 см3, добавляют 20 см3 этилового спирта,          пальмитата ( необходим только при определение витамина А в
энергично перемешивают в течение 15 мин, после чего дают         молоке в виде ретинолпальмитата)
отстояться 10 мин. Спиртовый раствор ретинолацетата                     Для приготовления исходного раствора ретинол-
переносят в мерную колбу вместимостью 25 см3 (при этом           пальмитата      используют    поливитаминные     препараты,
желатиновая капсула остается в стакане, т.к. не растворяется в   содержащие ретинолпальмитат и не содержащие других
спирте) и доводят до метки этиловым спиртом. Концентрацию        жирорастворимых витаминов (ретинолацетата, витаминов
ретинолацетата      определяют      спектрофотомётрическим       группы D и Е). Лекарственную форму (драже) растирают в
методом, измеряя оптическую плотность полученного                ступке, к полученному образцу прибавляют5 см3 раствора
раствора при 325 нм. Образец сравнения - этиловый спирт,         соляной кислоты с концентрацией 0.01 моль/дм3,нагретого до
использованный при приготовлении раствора.                       65 °С и выдерживают при этой температуре в течение 15мин.
       Концентрацию ретинолацетата в данном растворе С           Затем охлаждают, экстрагируют 5 см3 гексана, экстракт
(мкг/см3) рассчитывают по формуле:                               переносят в мерную колбу вместимостью 25 см3 и доводят
                                                                 гексаном до метки. Концентрацию полученного раствора
                     D                                           определяют спектрофотомётрическим методом, измеряя
          C = 10000 ×                                            оптическую плотность при 325 нм в кюветах с толщиной
                    E ×l                                         поглощающего слоя 1 см. Образец сравнения - гексан,
        где D - оптическая плотность.                            использованный при приготовлении раствора.
         l -толщина поглощающего слоя кюветы (см).                      Концентрацию ретинолпальмитата в данном растворе
        Е - коэффициент экстинкции;    для 1% раствора           С (мкг/см3)
ретинолацетата при 1=1 см Е=1550 ,                                      рассчитывают по формуле:
        Если полученное значение оптической плотности выше                      C = 10.26 x D
0.8, то раствор разбавляют этиловым спиртом таким образом,