Современные методы исследований в биохимии. Битуева А.В - 11 стр.

работы.                                                               Навеску пробы массой 4 г измельчают, добавляют 20
       Примечание: При работе с фармакопейными                см3 10%-ного этанольного раствора гидроксида калия (п.4.1),
препаратами витаминов возникает необходимость перевода        10 см3 водного 10%-ного раствора аскорбиновой кислоты
       Международных единиц активности (ME) витаминов в       (п.4.4), помещают в колбу, соединенную с обратным водяным
массовые.                                                     холодильником, и выдерживают на водяной бане при
       1 ME (международная единица) витамина А                температуре 85-90С в течение 60 мин, периодически
соотвествует0.344 мкг ретинолацетата или 0.555 мкг            перемешивая и избегая интенсивного кипения и прямого
ретинолпальмитатаили 0.300 мкг ретинола.       t              попадания солнечного света. Омыленную пробу охлаждают,
       1 ME (международная единица) витамина Е                добавляют 5 см3 воды и хорошо перемешивают. Содержимое
соотвествует 1.0 мг a-токоферолацетата или 0.909 мг а-        колбы переносят в делительную воронку, вносят 4 см3 гексана
токоферола.                                                   и экстрагируют неомыленную часть липидов, в том числе и
       5.      ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ                        витамины в виде ретинола и а-токоферола. Полученный
       При выполнении измерений необходимо соблюдать          экстракт используют для хроматографического определения
правила техники безопасности (ТБ) при работе с химическими    витаминов А и Е.
реактивами по ГОСТ 12.1.018-86 и ГОСТ 12.1.007-76,                    Продукты с высоким содержанием жира (масло,
требования       электробезопасности     при     работе   с   маргарин, мороженое, сыр) подвергают аналогичной
электроустановками по ГОСТ 12.1.019-79, а также требования,   обработке, но ограничивают величину навески таким образом,
изложенные в НТД на анализатор "ФЛЮОРАТ-02".                  чтобы она содержала не более 1 г жира, т.е. навеска
       6. УСЛОВИЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ИЗМЕРЕНИЙ.                       составляет для этой группы продуктов 1.5 г. Для более
       При выполнении измерений в лаборатории должны          полного гидролиза жиров рекомендуется увеличить объем
быть соблюдены следующие условия:                             добавляемой спиртовой щелочи, а также (или) увеличить
       Температура воздуха        20±10° С                    время гидролиза до 1 ч 30 мин
       Атмосферное давление       630-800 мм рт.ст.                   Одновременно проводят аналогичную обработку
       Влажность воздуха не более 80% при 25°С.               контрольного раствора, содержащего ретинолацетат и а-
       Напряжение в сети 220±10В.                             токоферолацетат в концентрациях, близких к ожидаемым в
       Частота       50±1 Гц                                  пробе. Для приготовления контрольного раствора в колбу
       7. ПОДГОТОВКА ПРОБЫ.                                   помещают необходимый объем стандартного исходного
       7.1 Отбор проб.                                        раствора ретинолацетата и стандартного исходного раствора
       Отбор и подготовка лабораторной пробы производится     а-токоферол ацетата, добавляют этанольный раствор
в соответствии с нормативно-технической документацией на      гидроксида калия (п.4.1) до 20 см3, 10 см3 водного 10%ного
данный вид продукта (сырья). Все виды продуктов и сырья, за   раствора аскорбиновой кислоты и проводят щелочной
исключением молока и молочной сыворотки, обрабатывают         гидролиз так же, как и пробы.
по п.8.2, а молоко и молочную сыворотку - по п.8.3.                   Аналогично обрабатывают холостую реактивную
       7.2. Гидролиз липидов.                                 пробу, в которой исследуемая навеска заменена равным по