Картирование генома и обратная генетика. Буторина А.К - 22 стр.

UptoLike

Рубрика: 

22
Рисунок 8. Применение метода ПЦР-анализа и анализа длины рест-
рикционных фрагментов (ПДРФ ) в криминалистике [Кольман , 2004]:
Для получения генетического отпечатка” : 1)ДНК-фрагмент, выделенный
из клетки подозреваемого и содержащий исследуемую последовательность ам -
плифицируют с помощью ПЦР, 2) разрезают подходящей рестриктазой , 3) фраг -
менты разделяют гель-электрофорезом, 4) специфический фрагмент выявляют с
помощью зонда.
Рестрикционная карта образца ДНК, выделенной из ткани, найденной на
месте преступления, четко совпадает с пробой , взятой у подозреваемого 2, а не у
подозреваемого 1.
К числу таких маркеров, основанных на ПЦР, относятся RAPD
маркеры и микросателлиты .
RAPD-маркеры РАПИД (random amplified polymorphic DNA=
RAPD-PCR - случайно амплифицированная полиморфная ДНК).
При необходимости амплификации гена, или фрагмента ДНК с из-
вестной нуклеотидной последовательностью используют два геноспеци-
фичных праймера, фланкирующих (ограничивающих) нужную последова-
тельность . В этом случае прямой праймер соответствует по нуклеотидной
последовательности началу нужного гена, а обратный комплементарен
второй цепи в конце этого гена. Таким образом можно исследовать поли-
                                      22




     Рисунок 8. Применение метода ПЦР-анализа и анализа длины рест-
рикционных фрагментов (ПДРФ) в криминалистике [Кольман, 2004]:

      Для получения “генетического отпечатка”: 1)ДНК-фрагмент, выделенный
из клетки подозреваемого и содержащий исследуемую последовательность ам-
плифицируют с помощью ПЦР, 2) разрезают подходящей рестриктазой, 3) фраг-
менты разделяют гель-электрофорезом, 4) специфический фрагмент выявляют с
помощью зонда.
      Рестрикционная карта образца ДНК, выделенной из ткани, найденной на
месте преступления, четко совпадает с пробой, взятой у подозреваемого 2, а не у
подозреваемого 1.

     К числу таких маркеров, основанных на ПЦР, относятся RAPD
маркеры и микросателлиты.
     RAPD-маркеры – РАПИД (random amplified polymorphic DNA=
RAPD-PCR - случайно амплифицированная полиморфная ДНК).
     При необходимости амплификации гена, или фрагмента ДНК с из-
вестной нуклеотидной последовательностью используют два геноспеци-
фичных праймера, фланкирующих (ограничивающих) нужную последова-
тельность. В этом случае прямой праймер соответствует по нуклеотидной
последовательности началу нужного гена, а обратный комплементарен
второй цепи в конце этого гена. Таким образом можно исследовать поли-