Картирование генома и обратная генетика. Буторина А.К - 8 стр.

UptoLike

Рубрика: 

8
Запись 7p11 означает, что ген локализован в первом бэнде первого
района короткого плеча хромосомы 7. Подобная запись позволяет локали-
зовать ген с точностью до одного бэнда и даже его субъединицы .
Рисунок 2. Дифференциально окрашенная Х - хромосома человека
[ Захаров, 1982].
При цитологическом картировании изучение дифференциально ок-
рашенных хромосом позволяет обнаружить крупные хромосомные пере-
стройки путем сравнения исследуемого образца с контрольным.
Применительно к человеку для цитологического картирования ис -
пользуют клетки пациентов с хромосомными болезнями. Если у больного
обнаружена делеция определенного участка конкретной хромосомы и в то
же время установлено нарушение функции какого-либо гена, то очевидно,
что ген находится в этом участке . При широком изучении хромосомных
болезней появилась возможность получения набора клеток с делециями
разной длины , т.е. возможность создания панелей клеток для разных хро-
мосом.
1.1.1. Гибридизация in situ: ISH- и FISH- гибридизация
Прямым методом картирования генов на хромосоме является метод
гибридизации нуклеиновых кислот. Вариации метода (гибридизация in situ
на месте ): ISH (in situ hybridization) и FISH (fluorescence in situ
hybridization) используются в тех случаях, когда имеются пробы , или зон-
ды с известными (секвенированными ) нуклеотидными последовательно-
стями. Зонды это искусственно синтезированные меченые: радиоактив-
ными изотопами (при ISH гибридизации) или флуоресцентными краси-
телями химически (при FISH- гибридизации) небольшие (10-30 нуклео-
                                   8
      Запись 7p11 означает, что ген локализован в первом бэнде первого
района короткого плеча хромосомы 7. Подобная запись позволяет локали-
зовать ген с точностью до одного бэнда и даже его субъединицы.




      Рисунок 2. Дифференциально окрашенная Х-хромосома человека
[Захаров, 1982].

      При цитологическом картировании изучение дифференциально ок-
рашенных хромосом позволяет обнаружить крупные хромосомные пере-
стройки путем сравнения исследуемого образца с контрольным.
      Применительно к человеку для цитологического картирования ис-
пользуют клетки пациентов с хромосомными болезнями. Если у больного
обнаружена делеция определенного участка конкретной хромосомы и в то
же время установлено нарушение функции какого-либо гена, то очевидно,
что ген находится в этом участке. При широком изучении хромосомных
болезней появилась возможность получения набора клеток с делециями
разной длины, т.е. возможность создания панелей клеток для разных хро-
мосом.

      1.1.1. Гибридизация in situ: ISH- и FISH- гибридизация
      Прямым методом картирования генов на хромосоме является метод
гибридизации нуклеиновых кислот. Вариации метода (гибридизация in situ
– на месте): ISH (in situ hybridization) и FISH (fluorescence in situ
hybridization) используются в тех случаях, когда имеются пробы, или зон-
ды с известными (секвенированными) нуклеотидными последовательно-
стями. Зонды – это искусственно синтезированные меченые: радиоактив-
ными изотопами (при ISH – гибридизации) или флуоресцентными краси-
телями – химически (при FISH- гибридизации) небольшие (10-30 нуклео-