Практическая газовая хроматография. Царев H.И - 143 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

АлтГУ | Барнаул

Составители: 

Рубрика: 

143
ляют сумму площадей всех пиков S и площади пиков каждого моносаха-
рида S
M
(как сумму площадей пиков его таутомеров).
Массовую долю каждого моносахарида, % к их общей массе, рас-
считывают по формуле:
100
S
S
X
M
M
⋅=
Определение времени удерживания моносахаридов
и построение градуировочных графиков
По первому варианту анализа (с внутренним стандартом) готовят
эталонные растворы определенной концентрации чистых моносахаридов
и внутреннего стандарта — сорбита. Для каждого моносахарида готовят
пять эталонных растворов концентрацией от 2 до 10 мг/см
3
. Концентра-
ция раствора сорбита постоянна — 4 мг/см
3
. Из каждого раствора отби-
рают три пробы, синтезируют ТМС-произродные и хроматографируют,
как указано выше. На каждой из трех хроматограмм для каждого пика
фиксируют значение t
R
, вычисляют площадь характеристического пика
таутомера моносахарида S
i
и площадь пика сорбита S
i
. Таким образом,
находят S
i
/ S
ст
для всех пяти эталонных растворов. По средним значени-
ям результатов трех параллельных анализов для каждого из пяти эталон-
ных растворов строят графики зависимости отношений S
i
/ S
ст
от массы
моносахаридов, пользуясь методом наименьших квадратов.
Время удерживания для каждого моносахарида находят по шкале
времени хроматограмм.
По второму варианту анализа для каждого моносахарида готовят
по одному эталонному раствору чистых моносахаридов концентрацией
4−6 мг/см
3
, синтезируют ТМС-производные и хроматографируют пробы
(три параллельных определения) в условиях, соответствующих методике
анализа, и определяют t
R
.
Примечания:
1. При подготовке гидролизатов вместо нейтрализации для удале-
ния кислоты можно применять аниониты.
2. Объем пробы гидролизата можно уменьшить так, чтобы масса
РВ в ней составляла около 10 мг, и анализ проводить в пенициллиновой
баночке.
3. Для получения более точных результатов рекомендуется раствор
пробы упаренного гидролизата в пиридине выдерживать в течение суток
для установления устойчивого равновесия между таутомерными форма-
ми моносахаридов. Время выдерживания можно сократить до 2 ч добав-
лением к пиридину 0,2% перхлората лития LiClO
4
⋅3Н
2
О.
                                                                   143

ляют сумму площадей всех пиков S и площади пиков каждого моносаха-
рида SM (как сумму площадей пиков его таутомеров).
      Массовую долю каждого моносахарида, % к их общей массе, рас-
считывают по формуле:
                                    SM
                             XM =      ⋅100
                                     S

Определение времени удерживания моносахаридов
и построение градуировочных графиков
      По первому варианту анализа (с внутренним стандартом) готовят
эталонные растворы определенной концентрации чистых моносахаридов
и внутреннего стандарта — сорбита. Для каждого моносахарида готовят
пять эталонных растворов концентрацией от 2 до 10 мг/см3. Концентра-
ция раствора сорбита постоянна — 4 мг/см3. Из каждого раствора отби-
рают три пробы, синтезируют ТМС-произродные и хроматографируют,
как указано выше. На каждой из трех хроматограмм для каждого пика
фиксируют значение tR, вычисляют площадь характеристического пика
таутомера моносахарида Si и площадь пика сорбита Si. Таким образом,
находят Si / Sст для всех пяти эталонных растворов. По средним значени-
ям результатов трех параллельных анализов для каждого из пяти эталон-
ных растворов строят графики зависимости отношений Si / Sст от массы
моносахаридов, пользуясь методом наименьших квадратов.
      Время удерживания для каждого моносахарида находят по шкале
времени хроматограмм.
      По второму варианту анализа для каждого моносахарида готовят
по одному эталонному раствору чистых моносахаридов концентрацией
4−6 мг/см3, синтезируют ТМС-производные и хроматографируют пробы
(три параллельных определения) в условиях, соответствующих методике
анализа, и определяют tR.
      Примечания:
      1. При подготовке гидролизатов вместо нейтрализации для удале-
ния кислоты можно применять аниониты.
      2. Объем пробы гидролизата можно уменьшить так, чтобы масса
РВ в ней составляла около 10 мг, и анализ проводить в пенициллиновой
баночке.
      3. Для получения более точных результатов рекомендуется раствор
пробы упаренного гидролизата в пиридине выдерживать в течение суток
для установления устойчивого равновесия между таутомерными форма-
ми моносахаридов. Время выдерживания можно сократить до 2 ч добав-
лением к пиридину 0,2% перхлората лития LiClO4⋅3Н2О.

Страницы