Физиологические и биохимические методы анализа растений. Чупахин Г.Н. - 44 стр.

   Данные показатели определяются по методу А.Т. Мокроносова и Р.А.
Борзенковой [1].
   Пробы для измерений отбираются с помощью пробочных сверл с из-
вестным диаметром. В любом случае желательно иметь данные о собст-
венном возрасте листа и площади листовой пластинки. Учитывая неодно-
родность разных участков листа, следует отбирать пробы либо на опреде-
ленном участке, либо брать средние пробы равномерно по всей поверхно-
сти листа. При массовых исследованиях на одном объекте рекомендуется
предварительно изучить степень структурной гетерогенности листовой
пластинки. Это особенно важно для листьев однодольных - очень неодно-
родных по длине. Для большинства двудольных растений можно рекомен-
довать проводить оценку на средних участках листа, справа или слева от
центральной жилки.
   Подсчет числа клеток, числа хлоропластов в клетке, определение раз-
мера клеток проводится на листьях,фиксированных в 70%-ном этаноле. В
этом случае пробы могут хранится в холодильнике в течение 3-4 месяцев.
       Количество клеток фотосинтезирующих тканей (тыс/см2)
   Для определения числа клеток в единице площади листья фиксируют
этанолом. Одна проба включает 5 дисков диаметром 9,8 мм (сверло №4,
общая площадь 3,8 см2).
   Подсчет числа клеток производят в суспензии после предварительной
мацерации тканей. Для получения суспензии пробирки с дисками, куда
приливают 1 мл раствора HCl, помещают на водяную баню. Условия маце-
рации тканей подбирают для каждого объекта. Мацерация для подавляю-
щего числа растений производится 0,5 -1,0 н. HCl при 60 - 100°. Некоторые
объекты (например, осоки и злаки) требуют более жестких условий маце-
рации, и концентрация HCl может увеличиваться до 5,0 н. Время мацера-
ции 10 - 30 мин. Затем объем доводят водой до 5 мл и пробирку тщательно
взбалтывают до получения однородной суспензии. Следует иметь в виду,
что слишком жесткие условия мацерации могут привести к разрушению
клеток. При работе с крупноклеточными объектами (картофель, свекла, та-
бак, салат, и др.) подсчет клеток ведут в камере Фукса-Розенталя (V = 3,2
мм3). Если клетки мелкие и в суспензии их очень много (большинство дре-
весных растений, злаки и др.), лучше использовать камеру Горяева (V = 0,9
мм3). Клетки подсчитывают по всему полю камеры. В исключительных
случаях подсчет ведут в 0,5 - 0,25 поля камеры.
   Самый простой подсчет - определение общего количества клеток в ка-
мере. Он производится при отсутствии дифференцировки листа на пали-



                                                                       43