Физиологические и биохимические методы анализа растений. Чупахин Г.Н. - 45 стр.

UptoLike

Составители: 

Рубрика: 

44
садную и губчатую ткани. Если лист дифференцирован, возможны сле-
дующие случаи.
1. На поперечном срезе листа видна резкая грань между палисадной и
губчатой тканью, и клетки этих тканей отличаются по форме. В суспензии
подсчитывают (отдельно) палисадные и губчатые клетки. Для проверки
нужно подсчитать общее число клеток. Если установлено, что сумма губ-
чатых и палисадных клеток, полученная путем сложения, равна или близка
к общей сумме клеток, полученной при подсчете, то в дальнейшем подсчет
общего числа клеток можно не производить.
2. Палисадная и губчатая ткани имеют резкую грань, но по форме клет-
ки мало отличаются друг от друга. В суспензии трудно различить палисад-
ные
и губчатые клетки. В этом случае на поперечном срезе определяют ко-
личественное соотношение палисадных (П) и губчатых (Г) клеток. Затем в
суспензии подсчитывают количество клеток. Зная отношение П/Г, можно
определить количество палисадных и губчатых клеток в суспензии.
3. Палисадная и губчатая ткани не имеют определенной грани: пали-
садная ткань постепенно
переходить в губчатую и, следовательно, имеется
слой клеток, которые можно отнести и к палисадной, и к губчатой ткани.
Здесь неизбежна условная граница между тканями или выделение третьего
промежуточного слоя. Как во втором случае, определяют соотношение П/Г
и вычисляют количество клеток разных тканей.
Следовательно, прежде чем приступить к мацерации, необходимо при
-
готовить поперечный срез листа и тщательно изучить степень дифферен-
цировки тканей.
При подсчете клеток следует учитывать только хлорофиллоносные
клетки и не принимать во внимание клетки эпидермиса, волосков, сосуди-
сто-волокнистых пучков и других тканей. Если условия мацерации ткани
выбраны верно и получена однородная суспензия, подсчет клеток будет
зависеть от тщательного
перемешивания суспензии перед взятием пробы и
правильного притирания стекла в камере. Анатомический анализ на
многих видах растений показал, что при подсчете клеток в камере наибо-
лее часто встречающийся коэффициент вариации (V%) равен 20%. За счет
тщательности работы наблюдателя коэффициент можно снизить до
10-15%.
Если V% = 20, то для определения среднего значения необходимо под-
считать количество
клеток не менее чем в 16 камерах при заданной ошибке
(Sx %) 10% при
β = 0,95 и не менее чем в 27 камерах при β = 0,99.
Для пересчета количества клеток в тыс./см
2
нужно умножить среднее
значение числа клеток в полном объеме камеры Фуксана коэффициент
садную и губчатую ткани. Если лист дифференцирован, возможны сле-
дующие случаи.
    1. На поперечном срезе листа видна резкая грань между палисадной и
губчатой тканью, и клетки этих тканей отличаются по форме. В суспензии
подсчитывают (отдельно) палисадные и губчатые клетки. Для проверки
нужно подсчитать общее число клеток. Если установлено, что сумма губ-
чатых и палисадных клеток, полученная путем сложения, равна или близка
к общей сумме клеток, полученной при подсчете, то в дальнейшем подсчет
общего числа клеток можно не производить.
    2. Палисадная и губчатая ткани имеют резкую грань, но по форме клет-
ки мало отличаются друг от друга. В суспензии трудно различить палисад-
ные и губчатые клетки. В этом случае на поперечном срезе определяют ко-
личественное соотношение палисадных (П) и губчатых (Г) клеток. Затем в
суспензии подсчитывают количество клеток. Зная отношение П/Г, можно
определить количество палисадных и губчатых клеток в суспензии.
    3. Палисадная и губчатая ткани не имеют определенной грани: пали-
садная ткань постепенно переходить в губчатую и, следовательно, имеется
слой клеток, которые можно отнести и к палисадной, и к губчатой ткани.
Здесь неизбежна условная граница между тканями или выделение третьего
промежуточного слоя. Как во втором случае, определяют соотношение П/Г
и вычисляют количество клеток разных тканей.
    Следовательно, прежде чем приступить к мацерации, необходимо при-
готовить поперечный срез листа и тщательно изучить степень дифферен-
цировки тканей.
    При подсчете клеток следует учитывать только хлорофиллоносные
клетки и не принимать во внимание клетки эпидермиса, волосков, сосуди-
сто-волокнистых пучков и других тканей. Если условия мацерации ткани
выбраны верно и получена однородная суспензия, подсчет клеток будет
зависеть от тщательного перемешивания суспензии перед взятием пробы и
правильного притирания стекла в камере. Анатомический анализ на
многих видах растений показал, что при подсчете клеток в камере наибо-
лее часто встречающийся коэффициент вариации (V%) равен 20%. За счет
тщательности работы наблюдателя коэффициент можно снизить до
10-15%.
    Если V% = 20, то для определения среднего значения необходимо под-
считать количество клеток не менее чем в 16 камерах при заданной ошибке
(Sx %) 10% при β = 0,95 и не менее чем в 27 камерах при β = 0,99.
    Для пересчета количества клеток в тыс./см2 нужно умножить среднее
значение числа клеток в полном объеме камеры Фукса – на коэффициент


44