ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
25 26
ее натриевая соль, которые улучшают доступность железа для кле-
ток.
Таблица 2
Состав питательных сред, применяемых при культивировании клеток и тканей
(по Р.Г.Бутенко, 1999)
Концентрация питательных сред, мг/л
Компонент сред
Мурасиге
и Ску-
га,1962
Гамборга
и Эвеле-
га,1968
Уайта,
1939
Нича и
Нич,1974
-1975
1 2 3 4 5
KNO
3
NH
4
NO
3
Ca(NO
3
)
2
Ca(NO
3
)
2
⋅4H
2
O
(NH
4
)
2
SO
4
MgSO
4
⋅7H
2
O
СaCl
2
⋅H
2
O
CaCl
2
⋅2H
2
O
KCl
KH
2
PO
4
NaH
2
PO
4
⋅H
2
O
MnSO
4
⋅Н
2
О
MnSO
4
⋅4Н
2
О
ZnSO
4
⋅4Н
2
О
ZnSO
4
⋅7Н
2
О
H
3
BO
4
CuSO
4
⋅5Н
2
О
Na
2
MoO
4
⋅2Н
2
О
CoCl
2
⋅6Н
2
О
FeSO
4
⋅7Н
2
О
NaEDTA⋅2Н
2
О
Cеквестрен 330-Fe
Мезоинозит
Аскорбиновая кислота
Тиамин – HCl
Пиридоксин – HCl
Никотиновая кислота
Сахароза
Агар «Дифко», гель-
1900
1650
-
-
-
370
-
440
-
170
-
-
22,3
8,6
-
6,2
0,025
0,25
0,025
27,8
37,3
-
100
-
-
0,5
0,5
0,5
30 000
3000
-
-
-
134
500
-
150
-
-
150
10
-
-
2
3
0,075
0,25
-
-
-
28
-
-
-
-
-
20 000
81
-
142
-
-
74
-
-
65
12
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
2000
950
72
-
-
-
185
166
-
-
68
-
-
25
-
10
10
0,025
0,25
-
27,8
37,3
-
200
3
3
1
-
60 000
7000
1 2 3 4 5
рит, агароза - -
2.3. Влияние физических факторов.
На рост и развитие растительных тканей in vitro большое
влияние оказывают физические факторы – свет, температура,
аэрация, влажность.
Свет. Большинство каллусных тканей могут расти в условиях
сильного освещения или в темноте, так как они не способны фото-
синтезировать. Вместе с тем свет может выступать как фактор,
обеспечивающий морфогенез и активирующий процесс вторично-
го синтеза. В качестве источника света используют люминесцент-
ные лампы. Для большинства растений оптимум освещенности со-
ставляет примерно 1000 люкс. Кроме интенсивности освещенности
на культуру ткани и её физиологические особенности влияет каче-
ство света. Так, более 20 флавонов и флавонолевых гликозидов об-
разуются в культурах клеток петрушки после освещения её непре-
рывным люминесцентным светом «холодный белый».
Температура. Для большинства каллусных культур опти-
мальна температура 26°С. В отличие от роста культур клеток и
тканей индукция их морфогенеза требует более низких температур
(18-20°С).
Аэрация. Для выращивания суспензионных культур большое
значение имеет аэрация. Особенно важно снабжение воздухом
культивируемых клеток в больших объемах ферментеров.
При выращивании клеток в малых объемах (в колбах) нор-
мальная аэрация достигается при постоянном перемешивании сус-
пензии.
Влажность. Оптимальная влажность в помещении, где растут
культуры, должны составлять 60-70%.
2.4. Методы культивирования изолированных клеток и
тканей для получения БАВ.
ее натриевая соль, которые улучшают доступность железа для кле- 1 2 3 4 5 рит, агароза - - ток. Таблица 2 Состав питательных сред, применяемых при культивировании клеток и тканей 2.3. Влияние физических факторов. (по Р.Г.Бутенко, 1999) На рост и развитие растительных тканей in vitro большое Концентрация питательных сред, мг/л влияние оказывают физические факторы – свет, температура, Мурасиге Гамборга Нича и аэрация, влажность. Компонент сред Уайта, и Ску- и Эвеле- Нич,1974 Свет. Большинство каллусных тканей могут расти в условиях 1939 га,1962 га,1968 -1975 1 2 3 4 5 сильного освещения или в темноте, так как они не способны фото- KNO3 1900 3000 81 950 синтезировать. Вместе с тем свет может выступать как фактор, NH4NO3 1650 - - 72 обеспечивающий морфогенез и активирующий процесс вторично- Ca(NO3)2 - - 142 - го синтеза. В качестве источника света используют люминесцент- Ca(NO3)2⋅4H2O - - - - ные лампы. Для большинства растений оптимум освещенности со- (NH4)2SO4 - 134 - - 370 500 74 185 ставляет примерно 1000 люкс. Кроме интенсивности освещенности MgSO4⋅7H2O СaCl2⋅H2O - - - 166 на культуру ткани и её физиологические особенности влияет каче- CaCl2⋅2H2O 440 150 - - ство света. Так, более 20 флавонов и флавонолевых гликозидов об- KCl - - 65 - разуются в культурах клеток петрушки после освещения её непре- KH2PO4 170 - 12 68 рывным люминесцентным светом «холодный белый». NaH2PO4⋅H2O - 150 - - - 10 - - Температура. Для большинства каллусных культур опти- MnSO4⋅Н2О 22,3 - - 25 мальна температура 26°С. В отличие от роста культур клеток и MnSO4⋅4Н2О ZnSO4⋅4Н2О 8,6 - - - тканей индукция их морфогенеза требует более низких температур - 2 - 10 (18-20°С). ZnSO4⋅7Н2О 6,2 3 - 10 H3BO4 0,025 0,075 - 0,025 Аэрация. Для выращивания суспензионных культур большое CuSO4⋅5Н2О 0,25 0,25 - 0,25 значение имеет аэрация. Особенно важно снабжение воздухом Na2MoO4⋅2Н2О 0,025 - - - культивируемых клеток в больших объемах ферментеров. CoCl2⋅6Н2О 27,8 - - 27,8 При выращивании клеток в малых объемах (в колбах) нор- FeSO4⋅7Н2О 37,3 - - 37,3 мальная аэрация достигается при постоянном перемешивании сус- NaEDTA⋅2Н2О - 28 - - Cеквестрен 330-Fe 100 - - 200 пензии. Мезоинозит - - - 3 Влажность. Оптимальная влажность в помещении, где растут Аскорбиновая кислота - - 3 культуры, должны составлять 60-70%. Тиамин – HCl 0,5 - - 1 Пиридоксин – HCl 0,5 - - - Никотиновая кислота 0,5 - - 60 000 Сахароза 30 000 20 000 2000 7000 2.4. Методы культивирования изолированных клеток и Агар «Дифко», гель- тканей для получения БАВ. 25 26
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 10
- 11
- 12
- 13
- 14
- …
- следующая ›
- последняя »