Основы биотехнологии: культивирование изолированных клеток и тканей растений. Учебно-методическое пособие. Часть 2. Цыренов В.Ж. - 6 стр.

как в меристематическое состояние. Размножение дифференциро-       ет свой цикл развития и повторяет развитие любой клетки, вклю-
ванных клеток приводит к анархическому, неорганизованному          чая деление, растяжение и дифференцировку, после чего наступает
росту, в результате чего образуется каллусная ткань. Таким обра-   старение и отмирание клетки.
зом, превращение специализированной ткани в каллусную связано            Для того чтобы не произошло старения, утраты способности
с индукцией клеточного деления, способность к которому она по-     к делению и отмирания каллусных клеток, первичный каллус, воз-
теряла в процессе дифференцировки.                                 никающий на эксплантах, через 4-6 недель переносят на свежую
     Процесс перехода к каллусному росту в базальной части         питательную среду. Эту операцию называют пассированием. При
апекса начинается с остановки клеточных делений. Лаг-фаза про-     регулярном пассировании способность к делению может поддер-
должается 24-48 часа, в течении которых клетки увеличиваются в     живаться в течении десятков лет.
размерах и ткань разрыхляется. После лаг-фазы клетки начинают            Кривая роста каллусных клеток имеет S-образную форму
быстро делиться, образуя каллусную ткань. Таким образом, если      (рис. 1). Такой характер роста легко обнаружить у суспензионных
дедифференцировка специализированной клетки связана с индук-       культур каллусных клеток.
цией деления под влиянием фитогормонов, то дедифференцировка             Особенности каллусных клеток. Каллусные клетки in vitro
делящейся меристематической клетки связана с остановкой деле-      сохраняют многие физиолого-биохимические свойства нормаль-
ния, деспециализицией клетки и только после этого – с индукцией    ных клеток. Каллусные клетки сохраняют способность к синтезу
деления, приводящей к каллусообразованию.                          вторичных метаболитов. Морозостойкость и способность к закали-
     Переход клетки in vitro из дифференцированного состояния к    ванию присущи каллусным клеткам, полученным из морозостой-
дедифференцировке и активным клеточным делениям обусловлен         ких растений.
изменением активности генов. Активирование одних генов и ре-             Общим у каллусных и пористых клеток является устойчи-
прессирование других приводит к изменению в белковом составе       вость к действию высоких температур, осмотически активных ве-
клеток. В каллусных клетках появляются специфические белки и       ществ, засолению.
одновременно исчезают белки, характерное для фотосинтезирую-             Каллусные клетки обладают отдельными свойствами, отли-
щих клеток листа.                                                  чающими их от нормальных. В них появляются специфические
     В клетках каллусной ткани происходит биохимические и ци-      белки и уменьшается количество белков, характерных для фото-
тологические изменения. Через 6-12 ч. после индукции дедиффе-      синтезирующих клеток листьев, или они совсем исчезают. Каллус-
ренцировки клеточная стенка разрыхляется и разбухает, увеличи-     ные клетки отличаются большой генетической гетерогенностью и
вается число свободных рибосом, число элементов аппарата Голь-     физиологической асинхронностью.
джи, а также размеры и число ядрышек. Все эти изменения пред-            В результате выхода из под контроля организма рост каллус-
шествуют началу деления, которые начинаются через 48-72 ч.         ных клеток происходит неорганизованно, асинхронно, и является
Следует учитывать, что в клетках экспланта в начале культивиро-    неограниченным. При пересадках на свежую питательную среду
вания могут наблюдаться изменения в метаболизме, вызванные как     культура каллусной ткани моркови, полученная Р. Готре более 60
дедифференцировкой, так и травматическими синтезами. Для раз-      лет назад, до сих пор растет в коллекции.
деления этих процессов лучше проводить прединкубацию экс-                Клеточный цикл у каллусных клеток более длителен, чем у
планта на безгормональной среде 3-6 сутки. Каллусная клетка име-   растений, произрастающих в открытом грунте.

                                                         13              14