Основы биотехнологии: культивирование изолированных клеток и тканей растений. Учебно-методическое пособие. Часть 2. Цыренов В.Ж. - 7 стр.

     Особенностью каллусных клеток является гетерогенность по          Гормононезависимые растительные ткани.
возрасту: одновременно присутствуют в каллусной ткани клетки           Каллусные клетки могут делиться только при наличии гор-
молодые и старые.                                                 монов в питательной среде. Однако, при длительном культивиро-
     Значительные отличия наблюдаются в энергетическом обме-      вании они в ряде случаев могут приобрести способность расти на
не каллусных клеток. Они потребляют меньше кислорода по срав-     среде без гормонов, т.е. становятся автономными по отношению к
нению с нормальными. Это свидетельствует о сдвиге соотношения     ауксинам и цитокининам. Такие клетки называются «привыкши-
между дыханием и брожением в сторону усиления брожения, т.е. о    ми». Нередко ткани, образованные «привыкшими» клетками, на-
снижении эффекта Пастера. Под эффектом Пастера понимают по-       зывают химическими опухолями. «Привыкшие» ткани, как и опу-
давление брожения дыханием в присутствии кислорода.               холевые, в большинстве случаев не способны к нормальной реге-
     Генетика каллусных клеток. Клетки каллусной ткани облада-    нерации и образуют лишь тератомы.
ют выраженной генетической гетерогенностью. Генетическая не-           У всех каллусных тканей, у некоторых культур уже начиная с
однородность каллусных клеток выражается прежде всего в раз-      4 пассажа, заметно снижается, а затем и полностью утрачивается
личной плотности, т.е. каллусные клетки отличаются по числу       способность к регенерации. Из старых пересадочных культур по-
хромосом. Генетически стабильными in vitro являются меристема-    лучить растения – регенеранты не удается.
тические ткани.                                                        Кроме «привыкших» тканей представляющих собой химиче-
     В каллусных и суспензионных культурах встречаются клетки,    ские опухоли, существуют опухоли растительного происхождения,
имеющие диплоидный набор хромосом, свойственный исходному         вызывающие бактериями, вирусами, а также генетические опухо-
растению, полиплоидные клетки, содержащие 3,4,5 и более хромо-    ли, возникающие на межвидовых гибридах различных растений.
сомных наборов. Наряду с полиплоидией в культуре каллусных        Это коростые галлы –опухоли, индуцированные у двудольных рас-
тканей можно нередко наблюдать анеуплоидию (возрастание или       тений агробактериями Agrobacterium tumefaciens, бородатый ко-
уменьшение хромосомного набора на несколько хромосом). Чем        рень, заболевание вызываемое A.rhizogenes и др.
длительнее культивируют каллусные клетки, тем больше они раз-          В «привыкших» тканях, также, как и опухолях, идет интен-
личаются по плоидности. В калусных клетках табака через четыре    сивный синтез собственных гормонов, поэтому они не нуждаются
года культивирования совсем не остается диплоидных клеток: все    во внесении их в питательные среды.
клетки становятся полиплоидными или анеуплоидными.                     У «привыкших» тканей гормононезависимость достигается в
     Кроме изменения плоидности, культивирование клеток и тка-    результате изменения активности генов, отвечающих за синтез
ней растений in vitro вызывает появление в клетках хромосомных    ферментных белков, участвующих в построении молекул гормо-
аббераций. Последние сказываются на биологических особенно-       нов, следовательно, отвечающих за синтез гормонов. В опухоле-
стях культивируемых тканей, изменяя их внешний вид, обмен ве-     вых тканях синтез гормонов связан с переносом в растительную
ществ, скорость роста.                                            клетку бактериального гена, отвечающего за этот процесс.
     Генетическое разнообразие каллусных клеток позволяет ис-
пользовать их для клеточных селекций на устойчивость к неблаго-       1.4 Культура протопластов.
приятным факторам среды, фитопатогенам и на повышенную про-
дуктивность.

                                                        15             16