Введение в прикладную биотехнологию. Ефимова М.В. - 30 стр.

     – проверка способности гибридомных клеток продуцировать мо-
ноклональные антитела к заданному антигену;
     – клонирование гибридных клеток, прошедших проверку на обра-
зование моноклональных антител, с контролем на стабильность их
иммунных свойств;
     – получение массовых культур гибридомных клеток.
     Гибридомные клетки из культуры можно выращивать и в организ-
ме животного – мыши или крысы. Для этого гибридомные клетки вво-
дят животному, опухоли из введенных клеток вырастают через 10–14 су-
ток. Начиная с этого времени у животных берут сыворотку, содержащую
высокие концентрации моноклональных антител.
     Моноклональные антитела применяют в настоящее время для ди-
агностики инфекционных и онкологических заболеваний и отрабатыва-
ют методы их использования для усовершенствования вакцин, изучения
патогенеза и иммунологии заболеваний, генетического анализа челове-
ка, лечения инфекционных и онкологических заболеваний.


       3.2.5. Особенности культивирования клеток животных

     Культивирование тканей животных широко применяется в вирусо-
логических исследованиях и при производстве вирусных вакцин. В ка-
честве примера можно рассмотреть получение вакцины Солка из ткане-
вой культуры почек обезьяны. Ткань коркового слоя свежих почек
измельчают и суспендируют в питательной среде, затем многократно
обрабатывают по 20 мин 0,5%-ным раствором трипсина при рН среды
7,6, чтобы ферментативно гидролизовать ткани и разделить клетки.
Суспензию центрифугируют и клетки суспендируют в той же среде
с добавлением плазмы телячьей крови или гидролизата лактальбумина.
Суспензию клеток инкубируют 5 суток в сосудах, где за это время на
стенках сосудов образуется однослойная пленка клеток.
     Когда клетки вырастут, жидкую фракцию сливают, клетки промы-
вают изотоническим раствором поваренной соли, добавляют свежую
среду и засеивают ее соответствующим вирулентным вирусом полио-
миелита. После трехсуточного инкубирования вируса клетки полностью
разрушаются, и вирусы переходят в раствор. Остатки клеток удаляют
центрифугированием, и оставшийся раствор используют для вакцина-
ции. Для сохранения вакцину замораживают.
     При помощи натуральных животных клеток получают также
β-интерферон и урокиназу.
     В последнее время культуры клеток животных стали использовать
также для получения биологически активных белков.

                                30