Хроматографические методы анализа. Гиндуллина Т.М - 38 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ТПУ | Томск

Составители: 

Рубрика: 

6. Жидкостная колоночная хроматография
Жидкостная хроматография (ЖХ) – это метод разделения и анализа
сложных смесей веществ, в котором подвижной фазой служит жид-
кость. Метод ЖХ применим для разделения более широкого круга ве-
ществ, чем метод ГХ, поскольку большинство веществ не обладает ле-
тучестью, многие из них неустойчивы при высоких температурах. В ЖХ
разделение чаще всего происходит при комнатной температуре. Жидкая
подвижная фаза, в отличие от газа в ГХ, выполняющего только транс-
портную функцию, является активным элюентом. Молекулы жидкой
фазы могут сорбироваться на поверхности неподвижной фазы. При про-
хождении через колонку находящиеся в элюенте молекулы интересую-
шего нас компонента должны вытеснить молекулы элюента с поверхно-
сти сорбента. Применяя различные элюенты, можно изменять парамет-
ры удерживания и селективность хроматографической системы.
В классическом варианте ЖХ в стеклянную колонку длиной 1–2 м,
заполненную сорбентом (размер частиц
і
100 мкм), вводят анализируе-
мую пробу и пропускают элюент. Скорость прохождения элюента под
действием силы тяжести мала, а продолжительность анализа значитель-
на. Однако такой вариант ЖХ не требует дорогостоящего оборудования
и до сих пор находит применение.
Вследствие использования сорбентов со значительно меньшим раз-
мером частиц (до 5–10 мкм), нагнетательных насосов, чувствительных
детекторов произошел переход от классической к высокоэффективной
жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), позволяющей проводить разделе-
ние и определение молекул, ионов, разделение макромолекул и биоло-
гически активных молекул. К достоинствам метода ВЭЖХ можно отне-
сти универсальность, возможность автоматизации разделения и анализа
сложных смесей органических и неорганических веществ, экс-
прессность, эффективность и высокую чувствительность. Это серийный
метод определения органических соединений многих классов, его широ-
ко используют при анализе смесей аминокислот, белков, лекарственных
препаратов. ВЭЖХ находит применение и в неорганическом анализе
для разделения ионов в зависимости от их размера.
6.1. Адсорбционная хроматография
В адсорбционном варианте жидкостной хроматографии в зависи-
мости от полярности неподвижной и подвижной фаз различают нор-
мально-фазовую (НФХ) и обращенно-фазовую (ОФХ) хроматографии.
В НФХ используют полярный адсорбент и неполярные подвижные
фазы. В ОФХ – неполярный адсорбент и полярные подвижные фазы.
38

Страницы