Биотехнология. Коростелева Н.И - 111 стр.

                  Лабораторная работа 6
        Методы стерилизации при проведении работ
   с культурой изолированных клеток и тканей растений
    Цель работы: усвоить способы стерилизации органов рас-
тений и экспланта.
    Материалы и оборудование: чашки Петри (3 шт., одна с
фильтровальной бумагой, стаканы химические на 300-500 мл
(2 шт.), колба на 1 л с дистиллированной водой, пробки с пита-
тельной средой М-С без гормонов и с гормонами (2,4-Д-2, кине-
тин – по 0,2 мг/л), пинцеты, скальпели (2 шт.), целлофан, шпа-
гат, ножницы, крафт-бумага для матрасиков.
    Объяснение. Основным условием успешного культивирова-
ния изолированных культур является стерильность питательной
среды, посуды, материалов, инструментов, посадочного мате-
риала. Все опыты проводят в стерильных помещениях-боксах
или ламинар-боксах.
    Стерилизация ламинар-бокса. Ламинар-боксы предназначе-
ны для культуры изолированных клеток, тканей и некоторых
других работ, требующих стерильности. Стерильность обеспе-
чивается с помощью бактериальных фильтров, установленных в
ламинар-боксе, через которые нагнетается воздух. За 2 ч до на-
чала работы ламинар-бокс облучают бактерицидными ультра-
фиолетовыми лампами. Предварительно в ламинаре размещают
спиртовую горелку, спички, фарфоровый стакан с 96%-ным
спиртом и стерильной водой, а при вычленении меристем – и
бинокулярную лупу. Внутреннюю поверхность ламинара, лупу,
спиртовку, пробирки с питательной средой протирают 70%-ным
спиртом.
    Работающий должен вымыть руки с мылом и протереть их
спиртом, надеть стерильный халат, завязать волосы стерильной
марлевой косынкой.
    Стерилизация посуды. Вначале посуду тщательно моют с
использованием детергентов (порошок «Прогресс» и др.), а так-
же раствора двухромовокислого калия в серной кислоте (хром-
пик). Вымытую посуду ополаскивают дистиллированной водой
и высушивают в сушильном шкафу. Чтобы избежать заражения
простерилизованных предметов из воздуха, перед стерилизаци-

                             111