Биотехнология. Коростелева Н.И - 44 стр.

UptoLike

Рубрика: 

44
встроить в хромосому. Клетки с «чужими» генами имеют пони-
женную скорость роста. Это сдерживает работы по генной ин-
женерии.
У животных работают промоторы только 4
генов: металло-
тионеина, трансферрина, иммуноглобулина и эластазы. Они
способны экспрессировать присоединенные к ним гены. Если
бактериальные гены трансформированы растениям, то нужно
заменить бактериальные промоторы на промоторы раститель-
ных генов либо на другие, которые могут инициировать транс-
крипцию в растительной клетке.
В качестве промотора для экспрессии бактериальных генов
наиболее часто используют промотор 35S-РНК вируса мозаики
цветной капусты (CaMV), который обеспечивает транскрипцию
в геномах как двудольных, так и однодольных растений, и вы-
сокий уровень экспрессии гена, находящегося под его контро-
лем. Даже при трансформации растительной клетки раститель-
ным геномом часто заменяют его собственный промотор на
промотор 35S CaMV как более сильный. В последнее время
иногда используют искусственно полученный МАС-промотор,
который представляет собой удвоенную последовательность
35S CaMV.
В последнее время все большее значение приобретают также
специфические промоторы; гены под их контролем экспресси-
руются только в определенных тканях (пататиновый промотор
будет экспрессировать ген только в клубнях картофеля).
В генной инженерии используются индуцибельные промо-
торы, которые экспрессируют гены только в определенных ус-
ловиях (при поранении или в присутствии ионов металлов). Не-
достатком многих тканеспецифических и индуцибельных про-
моторов является их слабая активность.
На экспрессию трансгена влияет также место интеграции его
в растительный геном. Очень часто т-ДНК встраивается в гете-
рохроматиновые районы, где экспрессия гена не будет происхо-
дить. Ситуацию можно преодолеть только повторными транс-
формациями.
Для выявления экспрессии чужеродных генов на ранних
стадиях получения трансгенных растений используют маркеры
экспрессии репортерные гены, генные продукты которых лег-
ко выявляются. Наиболее широко используемый репортерный
встроить в хромосому. Клетки с «чужими» генами имеют пони-
женную скорость роста. Это сдерживает работы по генной ин-
женерии.
    У животных работают промоторы только 4 генов: металло-
тионеина, трансферрина, иммуноглобулина и эластазы. Они
способны экспрессировать присоединенные к ним гены. Если
бактериальные гены трансформированы растениям, то нужно
заменить бактериальные промоторы на промоторы раститель-
ных генов либо на другие, которые могут инициировать транс-
крипцию в растительной клетке.
    В качестве промотора для экспрессии бактериальных генов
наиболее часто используют промотор 35S-РНК вируса мозаики
цветной капусты (CaMV), который обеспечивает транскрипцию
в геномах как двудольных, так и однодольных растений, и вы-
сокий уровень экспрессии гена, находящегося под его контро-
лем. Даже при трансформации растительной клетки раститель-
ным геномом часто заменяют его собственный промотор на
промотор 35S CaMV как более сильный. В последнее время
иногда используют искусственно полученный МАС-промотор,
который представляет собой удвоенную последовательность
35S CaMV.
    В последнее время все большее значение приобретают также
специфические промоторы; гены под их контролем экспресси-
руются только в определенных тканях (пататиновый промотор
будет экспрессировать ген только в клубнях картофеля).
    В генной инженерии используются индуцибельные промо-
торы, которые экспрессируют гены только в определенных ус-
ловиях (при поранении или в присутствии ионов металлов). Не-
достатком многих тканеспецифических и индуцибельных про-
моторов является их слабая активность.
    На экспрессию трансгена влияет также место интеграции его
в растительный геном. Очень часто т-ДНК встраивается в гете-
рохроматиновые районы, где экспрессия гена не будет происхо-
дить. Ситуацию можно преодолеть только повторными транс-
формациями.
    Для выявления экспрессии чужеродных генов на ранних
стадиях получения трансгенных растений используют маркеры
экспрессии – репортерные гены, генные продукты которых лег-
ко выявляются. Наиболее широко используемый репортерный

                             44