Спектрофотометрическое определение аминокислот в водных растворах. Котова Д.Л - 36 стр.

                                       36

                 6. ВЫ Б ОР ОП Т И М АЛ Ь Н Ы Х У С Л ОВИ Й
         С П Е К Т Р ОФ ОТ ОМ Е Т Р И ЧЕ С К ОГ О ОП Р Е Д Е Л Е Н И Я
                             АМ И Н ОК И С Л ОТ

       В ы бор опти мальны х у слови й коли чественного анали за ами ноки слот
заклю чается в опред елени и вли яни я рН , времени у становлени яравновеси я
при образовани и раствора ами ноки слоты в и нтервале концентраци и , в
котором соблю д ается основной закон светопоглощ ени я. След у ет
у чи ты вать, что область абсорбци онности , гд е относи тельная ош и бка ее
опред елени янепревы ш ает 3%, заклю чена в пред елах 0,2 - 0,8 [4].
       Д ля коли чественного опред елени я ами ноки слот (ф ени лалани на,
ти роз и на, три птоф ана, ги сти д и на и ци стеи на) наи более у д обен способ
град у и ровочного граф и ка. О д нако д ля вод ны х растворов, сод ержащ и х
несколько       и нд и ви д у альны х  ами ноки слот,    и з меряемая вели чи на
абсорбци онности          пред ставляет    собой     су мму     абсорбци онностей
опред еляемы х компонентов при у слови и , что межд у э ти ми компонентами
нет хи ми ческого и ли д ру гого ти па взаи мод ействи я, которое оказы вало бы
вли яни ена спектральны е характери сти ки поглощ аю щ и х вещ еств. П оэ тому
д ля коли чественного опред елени я и нд и ви д у альны х аромати чески х и
гетероци кли чески х ами ноки слот при и х совместном при су тстви и в
растворе целесообраз но и спользовать при нци п ад д и ти вности Ф и рорд та [4,
35,38].
       Д ля вы бора анали ти ческой д ли ны волны и и нтервала концентраци й , в
котором соблю д ается основной закон светопоглощ ени я, ежед невно по
точной навеске готовят станд артны й раствор ами ноки слоты опред еленной
концентраци и , и спольз у яф армакопейны еобразцы . Д ляполу чени яраствора
ами ноки слоты срН < pI и спользу ю т 0,005 М , 0,050 М и 0,100 М растворы
HCl; с pH > pI – 0,1 M и 1 М растворы NaOH. П ри опред елени и
ами ноки слот при меняю тся кю веты с толщ и ной поглощ аю щ его слоя 1 см.
Спектры поглощ ени я полу ченны х растворов сни маю т при температу ре
и змерени я рН раствора. Д ля опред елени я анали ти ческой д ли ны волны
полу чаю т полны й спектр поглощ ени я вод ного раствора и сслед у емой
ами ноки слоты (зави си мостьабсорбци онности от д ли ны волны ). И змерени я
провод ят через 20 нм, и , опред ели в грани цы макси му ма, повторяю т
и змерени я через 2 нм. В ы би раю т д ли ну волны , соответству ю щ у ю
макси мальному значени ю абсорбци онности .

                      6.1. О пределение ф енилаланина

      Д ляспектра вод ного раствора ф ени лалани на характерно нали чи етрех
макси му мов поглощ ени я при 191; 205 и 257 нм. М акси мальное з начени е
абсорбци онности и более ш и рокая полоса поглощ ени я соответству ет
д ли не волны 257 нм (ри с.5). М олярны й коэ ф ф и ци ент светопоглощ ени я
составляет вели чи ну ε257 = 0,18·103 ± 0,01·103 л/моль·см.