Спектрофотометрическое определение аминокислот в водных растворах. Котова Д.Л - 34 стр.

UptoLike

Рубрика: 

34
неподеленных электронных пар (n-электроны ). Положение полосы
поглощения определяется разностью энергий состояний, между которыми
происходит переход , и может быть охарактеризовано длиной волны в
максимуме полосы поглощения [4,30]. Такие аминокислоты , как
фенилаланин, тирозин и триптофан имеют в своей структуре бензольное
кольцо. Следует отметить, что в спектре поглощения бензола наблюдаются
три полосы поглощения при 180, 203, и 256 нм [4]. Установлено, что эти
полосы в спектре сохраняются, несколько изменяя своё положение и
интенсивность, для всех производных бензола.
Спектры поглощения аминокислот должны быть записаны в таких
условиях , чтобы оптимальным образом использовать возможности
спектрофотометрии, сведя к минимуму случайные и систематические
искажения спектра . Для устранения случайных ошибок значение сигнала
должно существенно превышать уровень шумов от приемника излучения.
Главной причиной систематических ошибок является большая ширина
щели прибора , в этом случае полоса поглощения оказывается более
широкой и менее интенсивной .
Поведение полос поглощения при использовании различных
растворителей дает информацию о свойствах поглощающей молекулы , об
их изменениях при оптическом возбуждении и о строении поглощающей
среды в целом. Главное требование к растворителю прозрачность в
области исследуемого поглощения, поэтому вода является универсальным
растворителем в спектрофотометрическом определении аминокислот,
существенно уменьшая случайные ошибки анализа.
Реальные электронные спектры редко содержат одну полосу , обычно
наблюдается несколько перекрывающихся полос. Вид двухполосного
спектра зависит от их относительной интенсивности и взаимного
расположения. Перекрывание двух симметричных близко расположенных
полос разной интенсивности приводит к появлению одной симметричной
полосы , максимум которой смещен относительно его положения в
первичной более интенсивной полосе. Если интенсивности
перекрывающихся полос равны , суммарная полоса симметрична и имеет
максимум посередине. Если же полосы удалены друг от друга так , что
расстояние между максимумами больше их полуширины , они видны
раздельно, и их максимумы не смещены [31,32].
Среди важнейших характеристик, влияющих на
спектрофотометрическое определение аминокислот в водном растворе,
необходимо отметить такие параметры , как рН раствора, его
концентрацию и время установления равновесия при растворении
цвиттерлита.
Спектры поглощения органических соединений, представляющих
собой кислоты или основания, зависят от рН среды. Известно, что
аминокислоты могут существовать в различных ионных формах в
зависимости от рН раствора [33]. Изменение кислотности раствора может
                                       34
непод еленны х э лектронны х пар (n-э лектроны ). П оложени е полосы
поглощ ени я опред еляется разностью э нерги й состояни й, межд у которы ми
прои сход и т переход , и может бы ть охарактери зовано д ли ной волны в
макси му ме полосы поглощ ени я [4,30]. Т аки е ами ноки слоты , как
ф ени лалани н, ти рози н и три птоф ан и мею т в своей стру кту ре бензольное
кольцо. След у ет отмети ть, что в спектрепоглощ ени ябензола наблю д аю тся
три полосы поглощ ени я при 180, 203, и 256 нм [4]. У становлено, что э ти
полосы в спектре сохраняю тся, несколько и зменяя своё положени е и
и нтенси вность, д лявсех прои звод ны х бензола.
     Спектры поглощ ени я ами ноки слот д олжны бы ть запи саны в таки х
у слови ях, чтобы опти мальны м образом и спользовать возможности
спектроф отометри и , свед я к ми ни му му слу чай ны е и си стемати чески е
и скажени я спектра. Д ля у странени я слу чай ны х ош и бок значени е си гнала
д олжно су щ ественно превы ш ать у ровень ш у мов от при емни ка и злу чени я.
Главной при чи ной си стемати чески х ош и бок является больш ая ш и ри на
щ ели при бора, в э том слу чае полоса поглощ ени я оказы вается более
ш и рокой и менееи нтенси вной.
      П овед ени е полос поглощ ени я при и спользовани и разли чны х
раствори телей д ает и нф ормаци ю о свойствах поглощ аю щ ей молеку лы , об
и х и зменени ях при опти ческом возбу жд ени и и о строени и поглощ аю щ ей
сред ы в целом. Главное требовани е к раствори телю – прозрачность в
области и сслед у емого поглощ ени я, поэ тому вод а является у ни версальны м
раствори телем в спектроф отометри ческом опред елени и ами ноки слот,
су щ ественно у меньш аяслу чайны еош и бки анали з а.
      Реальны е э лектронны е спектры ред ко сод ержат од ну полосу , обы чно
наблю д ается несколько перекры ваю щ и хся полос. В и д д ву хполосного
спектра зави си т от и х относи тельной и нтенси вности и взаи много
расположени я. П ерекры вани е д ву х си мметри чны х бли зко расположенны х
полос разной и нтенси вности при вод и т к появлени ю од ной си мметри чной
полосы , макси му м которой смещ ен относи тельно его положени я в
перви чной       более и нтенси вной       полосе.     Е сли     и нтенси вности
перекры ваю щ и хся полос равны , су ммарная полоса си мметри чна и и меет
макси му м посеред и не. Е сли же полосы у д алены д ру г от д ру га так, что
расстояни е межд у макси му мами больш е и х полу ш и ри ны , они ви д ны
разд ельно, и и х макси му мы несмещ ены [31,32].
      Сред и       важнейш и х       характери сти к,       вли яю щ и х      на
спектроф отометри ческое опред елени е ами ноки слот в вод ном растворе,
необход и мо отмети ть таки е параметры , как рН раствора, его
концентраци ю и время у становлени я равновеси я при растворени и
цви ттерли та.
      Спектры поглощ ени я органи чески х соед и нени й, пред ставляю щ и х
собой ки слоты и ли основани я, зави сят от рН сред ы . И з вестно, что
ами ноки слоты могу т су щ ествовать в разли чны х и онны х ф ормах в
з ави си мости от рН раствора [33]. И зменени е ки слотности раствора может