Спектрофотометрическое определение аминокислот в водных растворах. Котова Д.Л - 33 стр.

UptoLike

Рубрика: 

33
неподвижную фазу. Далее бумагу обрабатывают нингидрином в ацетоне и
нагревают до 100
0
С. Перемещение аминокислот, содержащих короткие
неполярные цепи или полярные боковые цепи , происходит медленнее, чем
движение аминокислот с длинными неполярными боковыми цепями [25].
Разделение аминокислот возможно с помощью элюентной
хроматографии на ионообменных смолах. Обычно используют колонки из
сульфированного полистирольного ионообменника с гранулами
сферической формы одинакового размера . Аминокислоты вымываются
растворами цитрата натрия при температуре 50
0
С и значениях рН от 3 до
6. Первыми выходят аминокислоты с двумя карбоксильными группами в
молекуле (аспарагиновая, глутаминовая кислота). Затем следуют
нейтральные аминокислоты с одной карбоксильной группой и одной
аминогруппой в молекуле. Цвиттерлиты с ароматическими кольцами
(тирозин, фенилаланин) удерживаются дольше других. Последними
вымываются основные” аминокислоты лизин, триптофан, аргинин [25].
Сотрудниками научной школы В . А . Даванкова были предложены
методы разделения оптических изомеров аминокислот, смесей пептидов и
аминокислот на модифицированных силикагелях и сверхсшитых
сорбентах Стиросорб” [26].
Авторами работы [27] предложено для экстракции аминокислот (в
частности , лизина ) применять экстрагирующую эмульсию, в качестве
органической мембраны - ди-2- этилгексилфосфорную кислоту в инертном
разбавителе, контактирующую с водным раствором.
Для количественного определения аминокислот можно применять
метод дифференциальной импульсной вольтамперометрии. Аминокислоты
взаимодействуют с фталевым альдегидом в присутствии меркаптановых
соединений, образующиеся изоиндолы окисляются на графитовом
электроде. Вольтамперограммы получаются при сканировании потенциала
на фоне боратного буферного раствора с рН 9,2 [28].
Также возможно потенциометрическое определение аминокислот с
помощью анион-селективных электродов пленочного типа на основе
раствора бромида тетрадециламмония в дибутилфталате. Измерения ЭДС
проводят при постоянном значении рН для определенной аминокислоты
[29].
5. ОСОБЕННОСТИ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЯ АМИНОКИСЛОТ В ВОДНЫХ РАСТВОРАХ
Спектрофотометрическое определение аминокислот основано на
поглощении их растворов в УФ области спектра из-за наличия у
цвиттерлитов π - электронной системы в углеводородном радикале. Для
водных растворов ароматических аминокислот поглощение в УФ и
видимой областях спектра связано с переходами валентных электронов
одинарных и кратных связей (σ и π электроны ) и электронов
                                        33
непод ви жну ю ф азу . Д алее бу магу обрабаты ваю т ни нги д ри ном в ацетоне и
нагреваю т д о 1000 С. П еремещ ени е ами ноки слот, сод ержащ и х коротки е
неполярны е цепи и ли полярны е боковы е цепи , прои сход и т мед леннее, чем
д ви жени еами ноки слот сд ли нны ми неполярны ми боковы ми цепями [25].
      Раз д елени е ами ноки слот возможно с помощ ью                э лю ентной
хроматограф и и на и онообменны х смолах. О бы чно и спольз у ю т колонки и з
су льф и рованного поли сти рольного и онообменни ка с грану лами
сф ери ческой ф ормы од и накового раз мера. А ми ноки слоты вы мы ваю тся
растворами ци трата натри я при температу ре 500 С и значени ях рН от 3 д о
6. П ервы ми вы ход ят ами ноки слоты с д ву мя карбокси льны ми гру ппами в
молеку ле (аспараги новая, глу тами новая ки слота). Затем след у ю т
нейтральны е ами ноки слоты с од ной карбокси льной гру ппой и од ной
ами ногру ппой в молеку ле. Ц ви ттерли ты с аромати чески ми кольцами
(ти роз и н, ф ени лалани н) у д ержи ваю тся д ольш е д ру ги х. П ослед ни ми
вы мы ваю тся“основны е” ами ноки слоты – ли зи н, три птоф ан, арги ни н [25].
      Сотру д ни ками нау чной ш колы В .А . Д аванкова бы ли пред ложены
метод ы разд елени я опти чески х и з омеров ами ноки слот, смесей пепти д ов и
ами ноки слот на мод и ф и ци рованны х си ли кагелях и сверхсш и ты х
сорбентах “Сти росорб” [26].
       А вторами работы [27] пред ложено д ля э кстракци и ами ноки слот (в
частности , ли зи на) при менять э кстраги ру ю щ у ю э му льси ю , в качестве
органи ческой мембраны - д и -2- э ти лгекси лф осф орну ю ки слоту в и нертном
разбави теле, контакти ру ю щ у ю свод ны м раствором.
      Д ля коли чественного опред елени я ами ноки слот можно при менять
метод д и ф ф еренци альной и мпу льсной вольтамперометри и . А ми ноки слоты
взаи мод ейству ю т с ф талевы м альд еги д ом в при су тстви и меркаптановы х
соед и нени й , образу ю щ и еся и зои нд олы оки сляю тся на граф и товом
э лектрод е. В ольтамперограммы полу чаю тся при скани ровани и потенци ала
на ф онеборатного бу ф ерного раствора срН 9,2 [28].
      Т акже возможно потенци ометри ческое опред елени е ами ноки слот с
помощ ью ани он-селекти вны х э лектрод ов пленочного ти па на основе
раствора броми д а тетрад еци ламмони я в д и бу ти лф талате. И змерени я Э Д С
провод ят при постоянном значени и рН д ля опред еленной ами ноки слоты
[29].

      5. ОС ОБ Е Н Н ОС Т И С П Е К Т Р ОФ ОТ ОМ Е Т Р И ЧЕ С К ОГ О
    ОП Р ЕД Е Л Е Н И Я АМ И Н ОК И С Л ОТ ВВОД Н Ы Х Р АС Т ВОР АХ

      Спектроф отометри ческое опред елени е ами ноки слот основано на
поглощ ени и и х растворов в У Ф – области спектра и з-за нали чи я у
цви ттерли тов π - э лектронной си стемы в у глевод ород ном рад и кале. Д ля
вод ны х растворов аромати чески х ами ноки слот поглощ ени е в У Ф и
ви д и мой областях спектра связано с переход ами валентны х э лектронов
од и нарны х и кратны х связей (σ и π э лектроны ) и э лектронов