Спектрофотометрическое определение аминокислот в водных растворах. Котова Д.Л - 32 стр.

                                             32
раствор окраш и вается в кроваво-красны й цвет. Д ля у скорени я появлени я
окраски раствор можно слегка под огреть. Реакти в М и ллона пред ставляет
собой смесь ни тратов и ни три тов рту ти (1) и (2), растворённы х в
концентри рованной азотной ки слоте. П ри взаи мод ействи и его с
ф енольны м яд ром ти роз и на возни кает ни трозоти рози н, рту тное
соед и нени екоторого окраш ено в красны й цвет.
      Д ляопр еделен и яги с т и ди н а и с пользует с яр еакци яП аули . (К 1мл 1%-
ного раствора су льф ани ловой ки слоты в 5%-ном растворе HCl при бавляю т
2 мл 0,5%-ного раствора ни три та кали я, си льно встряхи ваю т и немед ленно
при ли ваю т сначала 2 мл 0,01%-ного раствора ги сти д и на. Затем, после
перемеш и вани я сод ержи мого проби рки , при ли ваю т 6 мл 10%-ного
раствора карбоната натри я. Раз ви вается и нтенси вная ви ш нёво-красная
окраска). Д ляопр еделен и ят р и пт оф ан а – р еакци яГ опки н с а - К оле. (1 мл
0,005%-ного раствора три птоф ана смеш и ваю т в проби рке с равны м
объёмом раствора гли окси ловой ки слоты и д обавляю т 10 капель 0,04 М
раствора су льф ата мед и . П ри ли ваю т небольш и ми порци ями 2 – 3 мл
концентри рованной серной ки слоты , охлажд ая проби рку кажд ы й раз.
О ставляю т на 10 ми н при комнатной температу ре и ставят на 5 ми н в
ки пящ у ю вод яну ю баню . Разви вается си не-ф и олетовое окраш и вани е [23,
24].
      О д нако цветны е реакци и в больш и нстве своём не специ ф и чны ,
поэ тому коли чественное опред елени е ами ноки слот при помощ и цветны х
реакци й невсегд а над ёжно.
      Су щ еству ет ещ ё ряд метод ов коли чественного опред елени я
ами ноки слот. Е сли плотность окраски с ни нги д ри ном ами ноки слотной
вы тяжки и змери ть в колори метре и сопостави ть д алее с плотностью
окраски , разви ваю щ ей ся при взаи мод ей стви и с ни нги д ри ном смеси
ами ноки слот и звестного состава, то можно рассчи тать коли чественное
сод ержани е ами ноки слот в и сслед у емой пробе. К арбокси льны е гру ппы
ами ноки слот можно коли чественно у честь пу тём ти тровани я и х в
спи ртовой сред е. Т ак как в э ти х у слови ях д и ссоци аци я по ами ногру ппе
под авлена, ами ноки слоты вед у т себя как карбоновы е ки слоты и прямо
ти тру ю тся спи ртовы м раствором щ ёлочи . Разработан, кроме того, метод
ти тровани яами ноки слот в вод ной сред е. Ч тобы под ави тьд и ссоци аци ю по
ами ногру ппам, к ами ноки слотам д обавляю т раствор ф ормали на.
В оз ни кш и е при э том N-д и окси мети л-ами ноки слоты д и ссоци и ру ю т и
ти тру ю тся как обы чны е карбоновы е ки слоты . Н аконец, су ммарное
сод ержани е ами ноки слот часто опред еляю т пу тём реакци и по
ами ногру ппам.
       Т акже д ля коли чественного опред елени я ами ноки слот при меняю тся
хроматограф и чески е метод ы . В бу мажной хроматограф и и образ цы
ами ноки слот наносят на бу магу , котору ю под веш и ваю т в сосу д е, на д не
которого наход и тся смесь раствори телей. Д ля раз д елени я цви ттерли тов
и спольз у ю тся полярны е раствори тели в ви д е смеси вод ы , спи ртов, ки слот
и основани й. П олярны е раствори тели образ у ю т с целлю лоз ой