Влияние температуры и рН среды на активность фермента сахарозы. Крысанов Ю.В - 4 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

МичГАУ | Мичуринск

Составители: 

Рубрика: 

4
II.Изучение гидролитического действии фермента сахаразы
Для выполнения данной работы в соответствие с вариантами опыта
(см.таб. №1 ) необходимо взять семь чистых пробирок, пронумеровать их и на-
лить во все пробирки по 5мл раствора сахарозы. Затем в них добавить:
Пробирка № 1: 2 мл воды и 1 мл водной вытяжки из дрожжей, содержа-
щей фермент сахаразу;
Пробирка № 2: 2 мл воды и 1 мл фильтрата (водной вытяжки) из дрож-
жей;
Пробирка № 3: 2 мл воды и 1 мл фильтрата, предварительно охлажденно-
го в снегу в течение 10 минут;
Пробирка № 4: 2 мл воды и I мл вытяжки из дрожжей, предварительно
прокипяченной в течение 3-5 мин;
Пробирка № 5: 1,5 мл воды, 1 мл водной вытяжки из дрожжей и 0,5 мл
3% уксусной кислоты для создания слабокислой среды (рН=5,0);
Пробирка № 6: 1 мл фильтрата и 2 мл 3% уксусной кислоты, для создания
сильной кислотности среды (рН=3,5-4,0);
Пробирка № 7: 1 мл водной вытяжки из дрожжей и 2 мл 0,1н едкого на-
тра для создания щелочной среды (рН 8,0);
Пробирку №1 оставить при комнатной температуре (18-20°С), пробирку
№3 поместить немедленно в снег (0°С). Остальные (№ 2,3,4,5,6 и 7) выдержать
в водяной бане с температурой 40°С в течение получаса.
Через 30 минут пробирки из водяной бани поставить в холодную воду
для прекращения дальнейшего гидролиза сахарозы.
Затем взять семь чистых пробирок, пронумеровать их и налить во все
пробирки по I мл реактива Фелинга и 1мл воды. Отдельно каждую пробирку
нагреть до кипения и постепенно по каплям в горячий раствор внести инверти-
рованный (гидролизованный) раствор сахарозы до полного обесцвечивания
раствора Фелинга (от синего до кирпично-красного и коричневого). При этом
учесть количество капель (в каждом варианте опыта), необходимое для восста-
новления оксида меди (I) реактива Фелинга. Результаты записать в таблицу 1.
Сделать
вывод о зависимости активности фермента сахараза от темпера-
туры и рН среды.
PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version www.pdffactory.com
                II.Изучение гидролитического действии фермента сахаразы

              Для выполнения данной работы в соответствие с вариантами опыта
       (см.таб. №1 ) необходимо взять семь чистых пробирок, пронумеровать их и на-
       лить во все пробирки по 5мл раствора сахарозы. Затем в них добавить:
             Пробирка № 1: 2 мл воды и 1 мл водной вытяжки из дрожжей, содержа-
       щей фермент сахаразу;
             Пробирка № 2: 2 мл воды и 1 мл фильтрата (водной вытяжки) из дрож-
       жей;
             Пробирка № 3: 2 мл воды и 1 мл фильтрата, предварительно охлажденно-
       го в снегу в течение 10 минут;
             Пробирка № 4: 2 мл воды и I мл вытяжки из дрожжей, предварительно
       прокипяченной в течение 3-5 мин;
             Пробирка № 5: 1,5 мл воды, 1 мл водной вытяжки из дрожжей и 0,5 мл
       3% уксусной кислоты для создания слабокислой среды (рН=5,0);
             Пробирка № 6: 1 мл фильтрата и 2 мл 3% уксусной кислоты, для создания
       сильной кислотности среды (рН=3,5-4,0);
             Пробирка № 7: 1 мл водной вытяжки из дрожжей и 2 мл 0,1н едкого на-
       тра для создания щелочной среды (рН 8,0);
             Пробирку №1 оставить при комнатной температуре (18-20°С), пробирку
       №3 поместить немедленно в снег (0°С). Остальные (№ 2,3,4,5,6 и 7) выдержать
       в водяной бане с температурой 40°С в течение получаса.
             Через 30 минут пробирки из водяной бани поставить в холодную воду
       для прекращения дальнейшего гидролиза сахарозы.
             Затем взять семь чистых пробирок, пронумеровать их и налить во все
       пробирки по I мл реактива Фелинга и 1мл воды. Отдельно каждую пробирку
       нагреть до кипения и постепенно по каплям в горячий раствор внести инверти-
       рованный (гидролизованный) раствор сахарозы до полного обесцвечивания
       раствора Фелинга (от синего до кирпично-красного и коричневого). При этом
       учесть количество капель (в каждом варианте опыта), необходимое для восста-
       новления оксида меди (I) реактива Фелинга. Результаты записать в таблицу 1.
             Сделать вывод о зависимости активности фермента сахараза от темпера-
       туры и рН среды.




       4


PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version www.pdffactory.com

Страницы