Физико-химические основы биолюминесцентного анализа. Кудряшева Н.С - 66 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

СФУ | Красноярск

Составители: 

Рубрика: 

131
минесценции при различных концентрациях родамина) от кон-
центрации родамина 6Ж (С,М).
Повторить эксперимент, используя светофильтр ОС-13, от-
секающий всю область длин волн короче 550 нм. Сравнить по-
лученные результаты.
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА N5 (6 ЧАСОВ).
ДЕЙСТВИЕ НЕЛЮМИНЕСЦЕНТНЫХ СОЕДИНЕНИЙ НА
ИНТЕНСИВНОСТЬ БИОЛЮМИНЕСЦЕНЦИИ
Нелюминесцирующие при комнатной температуре (не-
флуоресцентные) соединения принадлежат к II-IV спектрально-
люминесцентным группам (см.табл.2). Соединения I спек-
трально-люминесцентной группы характеризуются малыми
выходами флуоресценции. Соединения этих групп не влияют
на положение и форму спектра биолюминесценции, однако из-
меняют общий выход свечения.
Нелюминесцентные
соединения могут влиять на биолюми-
несценцию как в результате воздействия на химической стадии
процесса, так и на стадии дезактивации образовавшихся элек-
тронно-возбужденных состояний эмиттера биолюминесценции
в результате абсорбции света или переноса энергии.
Рассмотрим подробнее процессы тушения электронно-
возбужденных состояний биолюминесценции в результате пе-
реноса энергии. Эти молекулы могут акцептиро-вать
, а могут и
не акцептировать энергию флуоресцентного состояния эмитте-
ра биолюминесценции. На рис.35 представлены 2 типа молекул
с различным положением возбужденных состояний относи-
тельно S
πl,π*
-уровня эмиттера биолюминесценции. Межмолеку-
лярный S-S перенос не может осуществляться для молекулы
антрахинона.
132
S
π
l
,π
*
S
0
Биолюминесцентный
эмиттер
Бензохинон
h
ν
T
π
l
,π∗
S
0
S
0
S
π,π
*
S
π,π
*
S
n
,π
*
S
n
,π
*
T
n
,π
*
T
n
,π
*
T
π,π
*
T
π,π
*
Антрахинон
Рис.35. Относительное расположение уровней энергии эмиттера
биолюминесценции, бензохинона и антрахинона
и межмолекулярный перенос энергии
При больших концентрациях тушителей возможно сбли-
жение и взаимодействие электронных оболочек соединений и
молекул эмиттера. Этот процесс можно рассматривать как об-
разование короткоживущих нелюми-несцентных ассоциатов.
Цель работы
- получить зависимость интенсивности био-
люминесценции от концентрации нелюминесцентных соедине-
ний.
Используем моноферментную биолюминесцентную реак-
цию, освоенную нами в лабораторной работе N1.
Ход работы

Страницы