ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
точка совпадает с изоионной точкой (это справедливо только при отсутст-
вии в растворе ионов, способных к специфическому связыванию с макро-
молекулой). Значение
pH
в изоэлектрической точке ( ) определяется
сложным характером ионизационных равновесий в растворе. Как правило,
для белков лежит в диапазоне 4,5 – 6,0.
I
pH
I
pH
В изоэлектрической точке макромолекулы сворачиваются в глобулы
и способны к агрегированию. По мере удаления от нее макромолекулы
становятся более вытянутыми за счет электростатического отталкивания
одноименно заряженных функциональных групп, а их агрегаты распада-
ются. В связи с этим максимальное светорассеяние должно наблюдаться у
растворов вблизи изоэлектрической точки, что позволяет на основании
измерения светорассеяния растворов при различных рН определить вели-
чину
.
I
pH
Порядок выполнения работы
Работу проводят с 1%-ным водным раствором желатины, которую
растворяют в горячей воде, фильтруют через бумажный фильтр для удале-
ния взвешенных частиц и охлаждают до комнатной температуры. В восемь
колб объемом 50 мл отбирают по 25 мл раствора желатины. С помощью
микропипеток в колбы добавляют кислоту или щелочь для достижения
различных значений
pH
. Объемы приливаемых растворов и ориентиро-
вочные значения их
pH
указаны в таблице 6.1. После добавления кислоты
или щелочи растворы тщательно без взбалтывания перемешивают. При
необходимости точные значения
pH
растворов устанавливают с помощью
pH
-метра.
Таблица 6.1
Объем приливаемых к растворам желатины кислоты или щелочи и
устанавливающиеся при этом
pH
№ колбы 1 2 3 4 5 6 7 8
Объем 0,1М HCl, мл 2,0 1,3 0,9 0,65 0,25 – – –
Объем 0,1М NaOH,
мл
– – – – – – 0,24 0,38
pH
2,0 3,0 3,5 4,0 4,5 5,0 7,0 9,0
Измерения проводят с помощью нефелометра «НФМ», оптическая
схема которого приведена в работе №3. Кювету нефелометра заполняют
исследуемым раствором и устанавливают в камеру прибора, камеру запол-
39
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 37
- 38
- 39
- 40
- 41
- …
- следующая ›
- последняя »