ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
16
ля, можно увидеть как светящиеся на темном фоне. Метод успешно при-
меняется при изучении живых клеток.
Метод фазово-контрастной микроскопии также широко использу-
ется для наблюдений за живыми неокрашенными клетками. Он основан на
том , что отдельные участки хотя и прозрачной клетки , могут отличаться
друг от друга по плотности и по светопреломлению . Проходя через них,
свет изменяет свою фазу, однако, такое изменение фазы световой волны
наш глаз не улавливает, так как он чувствителен только к изменению ин-
тенсивности света. Последняя зависит от величины амплитуды световой
волны. Для получения изображения объекта в объектив фазово-
контрастного микроскопа вмонтирована специальная пластинка, которая
фазовые изменения преобразует в амплитудные . В результате происходит
смещение фаз , приводящее к изменению яркости и контрастности изобра-
жения. Объекты и их детали, не видимые в микроскопе при обычном про-
ходящем свете , становятся видимыми.
При изучении живых клеток широко используют флуоресцирующие
красители (флюорохромы) и метод флуоресцентной микроскопии. Суть
его заключается в том , что целый ряд веществ обладает способностью све-
титься (флуоресцировать , люминесцировать ) при освещении невидимыми
коротковолновыми лучами (ультрафиолета, рентгеновскими и др.). Этот
принцип используют во флуоресцентной микроскопии: рассматривание
флуоресцирующих объектов в зоне коротких длин волн. Обычно в таких
микроскопах применяются фильтры, дающие освещение в сине-
фиолетовой области.
В последнее время для изучения живых клеток или их компонентов
начинает широко применяться сочетание световой микроскопии (особенно
фазово-контрастной ) с электронно-компьютерной обработкой изображе-
ния. Применение таких систем не только заменяет кино- и фотосъемку,
вместо которой используется цифровая видеозапись, но и позволяет про-
водить компьютерную обработку изображения: сведения о плотности
структур, их параметрах , числе и трехмерной организации.
Электронная микроскопия . Создание электронных микроскопов
связано с открытием электронов и изучением свойств и явлений , которые
имеют место при их движении. Еще в 1924 году было известно, что элек-
тронам присущи волновые свойства и что длина волны электрона обратно
пропорциональна его скорости (Л . де Бройл). В 1926 году Г. Буш создал
первую магнитную линзу и установил , что электронный луч можно фоку-
сировать , пропуская через магнитное поле. Эти два свойства электронного
луча послужили основой для создания в апреле 1931 года немецким уче -
ным М . Кнолем и Э. Руска первого электронного микроскопа. В нашей
стране первый электронный микроскоп был создан в 1940 году в Государ -
ственном оптическом институте в лаборатории А .А . Лебедева. В настоя-
щее время выпуском ЭМ в СНГ занимается Сумское ПО “Электрон” (Ук –
раина).
16 л я, можно увиде ть как с ве тящ ие с я нате мном фоне . М е тод ус пе ш но при- ме няе тс япри изуче нии живых кл е ток. М ет од ф азов о-кон т р ас т н ой м икр ос коп ии также ш ироко ис пол ь зу- е тс ядл янабл ю де ний заживыми не окраш е нными кл е тками. О н ос нован на том, что отде л ь ные учас тки хотя и прозрачной кл е тки, могут отл ичать с я друг от друга по пл относ ти и по с ве топре л омл е нию . П роходя че ре з них, с ве т изме няе т с вою фазу, однако, такое изме не ние фазы с ве товой вол ны наш гл аз не ул авл ивае т, так как он чувс твите л е н тол ь ко к изме не нию ин- те нс ивнос ти с ве та. П ос л е дняя завис ит от ве л ичины ампл итуды с ве товой вол ны. Д л я пол уче ния изображе ния объ е кта в объ е ктив фазово- контрас тного микрос копа вмонтирована с пе циал ь ная пл ас тинка, которая фазовые изме не ния пре образуе т в ампл итудные . В ре зул ь тате проис ходит с ме щ ение фаз, приводящ е е к изме не нию яркос ти и контрас тнос ти изобра- же ния. О бъ е кты и их де тал и, не видимые в микрос копе при обычном про- ходящ е м с ве те , с тановятс явидимыми. П ри изуче нии живых кл е ток ш ироко ис пол ь зую т фл уоре с цирую щ ие крас ите л и (фл ю орохромы) и м ет од ф л уор ес цен т н ой м икр ос коп ии. Суть е го закл ю чае тс яв том, что це л ый ряд ве щ е с тв обл адае т с пос обнос ть ю с ве - тить с я (фл уоре с цировать , л ю мине с цировать ) при ос ве щ е нии не видимыми коротковол новыми л учами (ул ь трафиол е та, ре нтге новс кими и др.). Э тот принцип ис пол ь зую т во фл уоре с це нтной микрос копии: рас с матривание фл уоре с цирую щ их объ е ктов в зоне коротких дл ин вол н. О бычно в таких микрос копах приме няю тс я фил ь тры, даю щ ие ос ве щ е ние в с ине - фиол е товой обл ас ти. В пос л е дне е вре мя дл я изуче ния живых кл е ток ил и их компоне нтов начинае т ш ироко приме нять с яс оче тание с ве товой микрос копии (ос обе нно фазово-контрас тной ) с элект ро н н о -ко мпь ют ерн о й о бра бо т ко й и зо бра ж е- н и я. П риме не ние таких с ис те м не тол ь ко заме няе т кино- и фотос ъ е мку, вме с то которой ис пол ь зуе тс я цифровая виде озапис ь , но и позвол яе т про- водить компь ю те рную обработку изображе ния: с ве де ния о пл относ ти с труктур, их параметрах, чис л е и тре хме рной организации. Э л ект р он н ая м икр ос коп ия. Создание эл е ктронных микрос копов с вязано с открытие м эл е ктронов и изуче ние м с вой с тв и явл е ний , которые име ю т ме с то при их движе нии. Е щ е в 1924 году был о изве с тно, что эл е к- тронам прис ущ и вол новые с вой с тваи что дл инавол ны эл е ктронаобратно пропорционал ь на е го с корос ти (Л . де Брой л ). В 1926 году Г. Буш с оздал пе рвую магнитную л инзу и ус тановил , что эл е ктронный л уч можно фоку- с ировать , пропус кая че ре з магнитное пол е . Э ти двас вой с тваэл е ктронного л уча пос л ужил и ос новой дл я с оздания в апре л е 1931 года не ме цким уче - ным М . Кнол е м и Э . Р ус ка пе рвого эл е ктронного микрос копа. В наш ей с тране пе рвый эл е ктронный микрос коп был с оздан в 1940 году в Гос удар- с тве нном оптиче с ком инс титуте в л аборатории А .А . Л е бе де ва. В нас тоя- щ е е вре мявыпус ком Э М в СН Г занимае тс яСумс кое П О “Э л е ктрон” (Ук – раина).
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 14
- 15
- 16
- 17
- 18
- …
- следующая ›
- последняя »