Цитологическое изучение растительных и животных клеток. Машкина О.С - 15 стр.

UptoLike

15
2. Перечислите и охарактеризуйте основные составляющие светово-
го микроскопа.
3. Как отличить иммерсионные объективы от сухих? В чем преиму-
щество их использования?
4. Что такое разрешающая способность микроскопа? От чего она за-
висит? Как ее улучшить (повысить )?
5. Как определить общее увеличение микроскопа? Сформулируйте
правило подбора окуляров у светового микроскопа.
6. Что такое фиксатор? Какие существуют типы фиксаторов? Каков
механизм их действия?
7. Для чего проводится предобработка материала перед фиксацией?
8. Какие красители используют в цитологических исследованиях ?
9. Чем отличаются давленые от микротомных препаратов? В каких
случаях их применяют?
10. Каковы основные этапы изготовления постоянных микротомных
препаратов? В каких случаях их применяют?
11. Опишите кратко основные этапы изготовления давленых препа-
ратов для цитологических исследований . В каких случаях их применяют?
12. Перечислите основные различия в строении клеток растений и
животных.
Тема 2. ЭЛЕКТРОННАЯ МИКРОСКОПИЯ
КАК МЕТОД ЦИТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ
Цель занятия : 1. Ознакомление с устройством , принципом работы,
типами и возможностями электронного микроскопа. 2. Ознакомление с ос -
новными этапами изготовления ультратонких срезов для их изучения с
помощью электронного микроскопа. 3. Выделить принципиальные отли-
чия электронного микроскопа от светового, методов изготовления микро-
препаратов для световой и электронной микроскопии (сравнительный ана-
лиз).
Основные теоретические положения.
Как уже отмечалось выше, один из основных методов цитологиче -
ских исследований метод светлопольной световой микроскопии, разре-
шающая способность которого при использовании видимой области света
составляет 0,2-0,3 мкм .
Различные методы контрастирования, используемые в световой мик-
роскопии, позволяют увидеть частицы, имеющие величину менее 0,2 мкм .
К ним относится темнопольная, фазово-контрастная, флуоресцентная мик-
роскопия и другие методы.
Метод «темного поля». В этом случае свет от осветителя не попада-
ет в объектив. Освещение осуществляется косыми лучами, что достигается
с помощью конденсора темного поля, вставляемого на место обычного. В
объектив попадает свет, отраженный от объекта. Ультрамикроскопические
объекты (размером меньше 0,2 мкм ), не видимые при методе светлого по-
                                          15
        2. П е ре чис л ите и охаракте ризуй те ос новные с ос тавл яю щ ие с ве тово-
го микрос копа.
        3. Как отл ичить имме рс ионные объ е ктивы от с ухих? В че м пре иму-
щ е с тво их ис пол ь зования?
        4. Ч то такое разре ш аю щ ая с пос обнос ть микрос копа? О т че го оназа-
вис ит? Как е е ул учш ить (повыс ить )?
        5. Как опре де л ить общ е е уве л иче ние микрос копа? Сформул ируй те
правил о подбораокул яров у с ве тового микрос копа.
        6. Ч то такое фикс атор? Какие с ущ е с твую т типы фикс аторов? Каков
ме ханизм их де й с твия?
        7. Д л яче го проводитс япре добработкамате риал апе ре д фикс ацие й ?
        8. Какие крас ите л и ис пол ь зую т в цитол огиче с ких ис с л е дованиях?
        9. Ч е м отл ичаю тс я давл е ные от микротомных пре паратов? В каких
с л учаях их приме няю т?
        10. Каковы ос новные этапы изготовл е ния пос тоянных микротомных
пре паратов? В каких с л учаях их приме няю т?
        11. О пиш ите кратко ос новные этапы изготовл е ния давл е ных пре па-
ратов дл яцитол огиче с ких ис с л е дований . В каких с л учаях их приме няю т?
        12. П е ре чис л ите ос новные разл ичия в с трое нии кл е ток рас те ний и
животных.

               Т ем а 2. Э Л Е К Т РО Н Н А ЯМ И К РО С К О ПИ Я
        К А К М ЕТ О Д Ц И Т О Л О Г И Ч ЕС К И Х И С С Л ЕДО В А Н И Й

        Ц ел ь зан ят ия: 1. О знакомл е ние с ус трой с твом, принципом работы,
типами и возможнос тями эл е ктронного микрос копа. 2. О знакомл е ние с ос -
новными этапами изготовл е ния ул ь тратонких с ре зов дл я их изуче ния с
помощ ь ю эл е ктронного микрос копа. 3. В ыде л ить принципиал ь ные отл и-
чия эл е ктронного микрос копаот с ве тового, ме тодов изготовл е ния микро-
пре паратов дл я с ве товой и эл е ктронной микрос копии (с равните л ь ный ана-
л из).
        О с н овн ы е т еорет и чес ки е полож ен и я.
        Как уже отме чал ос ь выш е , один из ос новных ме тодов цитол огиче -
с ких ис с л едований – ме тод с ве тл опол ь ной с ве товой микрос копии, разре -
ш аю щ ая с пос обнос ть которого при ис пол ь зовании видимой обл ас ти с ве та
с ос тавл яе т 0,2-0,3 мкм.
        Р азл ичные ме тоды контрас тирования, ис пол ь зуе мые в с ве товой мик-
рос копии, позвол яю т увиде ть час тицы, име ю щ ие ве л ичину ме не е 0,2 мкм.
К ним относ итс я те мнопол ь ная, фазово-контрас тная, фл уоре с це нтная мик-
рос копияи другие ме тоды.
        М ет од «т ем н ого п ол я». В этом с л учае с ве т от ос ве тите л яне попада-
е т в объ е ктив. О с ве щ е ние ос ущ е с твл яе тс якос ыми л учами, что дос тигае тс я
с помощ ь ю конденс орате много пол я, вс тавл яе мого намес то обычного. В
объ е ктив попадае т с ве т, отраже нный от объ е кта. Ул ь трамикрос копиче с кие
объ е кты (разме ром ме нь ш е 0,2 мкм), не видимые при ме тоде с ве тл ого по-