Цитологическое изучение растительных и животных клеток. Машкина О.С - 13 стр.

                                        13
         3. Пр едобр абот ка п ер ед ф иксацией. М ате риал , пре дназначе нный
дл я подс че та чис л а и изуче ния морфол огии хромос ом пре добрабатываю т
пе ре д фикс ацие й ве щ е с твами, ул учш аю щ ими разброс и конде нс ацию хро-
мос ом (кол хицином, 8-окс ихинол ином, парадихл орбе нзол ом, хол одом и
др.), зате м промываю т дис тил л ированной водой и фикс ирую т. Так, дл я
объ е ктов с крупными хромос омами (наприме р, с ос ны обыкнове нной , л и-
с тве нницы) мате риал поме щ аю т в 1% -ный рас твор кол хицинаи выде ржи-
ваю т в те че ние 5-6 час ов при комнатной те мпе ратуре . Д л яобъ е ктов с ме л -
кими хромос омами (например, виш ни, че ре ш ни, бе ре зы, топол я) мате риал
выде рживаю т в 0,002 М рас творе 8-окс ихинол инапри те мпе ратуре 10-140С
в те че ние 3-4 час ов.
         4. М ацер ация (л ат. maceratio – размягче ние , рас пад ткани на от-
де л ь ные кл е тки). Зафикс ированные коре ш ки (ил и це л ые пророс тки) по-
ме с тить в фарфоровый тиге л ь , нал ить 18% рас твор с ол яной кис л оты и ос -
торожно подогре ть до те мпе ратуры приме рно 600С.
         5. П ромыть коре ш ки (ил и пророс тки) в не с кол ь ких с ме нах дис тил -
л ированной воды, с пол ос нуть один раз в 45 % рас твором укс ус ной кис л о-
ты и поме с тить в с ве жую порцию кис л оты на5-15 минут. О бработкамате -
риал а с ол яной и укс ус ной кис л отой не обходима дл я е го мацерации (раз-
мягче ния в ре зул ь тате рас творе ния кл е точных с те нок и разъ е дине ния кл е -
ток) и л учш е го раздавл ивания (л учш е го рас пре де л е ния кл е ток) при изго-
товл е нии микропре паратов.
         6. О кр аш ив ан ие. Д л я окраш ивания пре паратов давл е ной ткани в
каче с тве крас ите л е й в ос новном ис пол ь зую т ге матокс ил ин, орс е ин, кар-
мин, ре актив Ш иффа(фукс инс е рнис тую кис л оту). Р ас с мотрим окраш ива-
ние мате риал ааце то-же л е зо-ге матокс ил ином, приготовл е нным из экс трак-
такампе ш е вого де ре ва. П омес тить коре ш ки (ил и це л ые пророс тки) в кра-
с ите л ь аце то-же л е зо-ге матокс ил ин на30-60 минут (дл я с ос ны обыкнове н-
ной , л укаи др.) при комнатной те мпе ратуре . П родол жите л ь нос ть окраш и-
вания ге матокс ил ином у разных объ е ктов с ос тавл яе т от не с кол ь ких минут
до 24 час ов при комнатной те мпе ратуре .
         О пе рации 5 и 6 проводят в фарфоровых тигл ях, закрытых крыш ками.
         7. Тщ ате л ь но промыть окраш е нный мате риал в дис тил л ированной
воде . В с л учае не обходимос ти мате риал може т ос тавать с яв воде в ус л ови-
ях хол одил ь никав те че ние 2-х – 3-х с уток.
         8. Д л яизвл е че нияизбыткакрас ки коре ш ок поме с тить напре дме тное
с те кл о в капл ю 45% укс ус ной кис л оты ил и с ме с ь 45% укс ус ной кис л оты и
80% хл орал гидрата.
         9. Раздав л ив ан иеобъект а. О тде л ить кончик коре ш капророс тка(не
бол е е 1,5-2 мм) пре паровал ь ной игл ой (ил и л е звие м). П оме с тить е го на
пре дме тное с те кл о в капл ю жидкос ти Гой е ра(прос ве тл яю щ е й и конс е рви-
рую щ е й , в с ос тав которой входит гуммиарабик=виш не вый кл е й , гл ице рин,
хл орал гидрат и дис тил л ированная вода), накрыть покровным с те кл ом.
Л е гким надавл ивание м ручкой пре паровал ь ной игл ы рас пре де л яю т кл е тки
в один с л ой . Зате м покровное с те кл о накрываю т пол ос кой фил ь тровал ь ной