Цитологическое изучение растительных и животных клеток. Машкина О.С - 11 стр.

                                          11
        Д л я изуче ния ме й озапри микрос пороге не зе фикс ирую т бутоны, мо-
л одые кол ос ь я зане с кол ь ко не де л ь (ил и дне й ) до рас пус кания, выкол аш и-
вания. О пл одотворе ние и разл ичные этапы эмбриоге не за набл ю даю т в
опыл е нных цве тках че ре з опре де л е нные проме жутки вре ме ни пос л е нане -
с е нияпыл ь цы нарыл ь це пе с тика.
        Ф и кса т о р(ко н серви рующа я ж и дко ст ь ) – это с ме с ь разл ичных ре ак-
тивов: с пирта, укс ус ной кис л оты, ал ь де гидов и др., которая быс тро прони-
кае т в ткань , кл е тки и фикс ируе т (убивае т) их. В ажно выбрать такой фик-
с атор, который , убивая кл е тку, макс имал ь но с охраняе т прижизне нную
с труктуру е е компоне нтов, подл е жащ их изуче нию . П ри фикс ации кол л ои-
ды кл е ток пе ре ходят в не рас творимое с ос тояние и приобре таю т с пос об-
нос ть окраш ивать с якрас ите л ями.
        Ф икс аторы подразде л яю т натри группы: 1) фикс ирую щ ие ядро, ил и
яде рные фикс аторы (фикс аторы Н аваш ина, Карнуа, М одил е вс кого и др.);
2) фикс ирую щ ие цитопл азму (фикс аторы Ф л е мминга, Ге рмана и др.); 3)
фикс ирую щ ие органоиды кл е тки (фикс аторы Л е витс кого, Р е го и др.).
        В каче с тве компоне нтов яде рных фикс аторов обычно ис пол ь зую т
с л е дую щ ие ве щ е с тва: с пирт, укс ус ную кис л оту, хромовую кис л оту, фор-
мал ин, ос мие вую кис л оту, пропионовую кис л оту и др. Укс ус ная кис л ота,
наприме р, в конце нтрации 98% (л е дяная укс ус ная кис л ота– Л УК) хорош о
ос аждае т нукл е иновые кис л оты, хорош о с охраняе т форму хромос ом, но
разруш ае т митохондрии и аппарат Гол ь джи. Спирты вызываю т не обрати-
мую де натурацию бе л ков, ос ажде ние нукл е иновых кис л от и пол ис ахари-
дов. А л ь де гиды (наприме р, формал ь де гид) хорош о с вязывае тс я с бе л ками,
вызываяих де натурацию , нукл е иновыми кис л отами, л ипидами.
        В с е рас творы фикс аторов готовят на с пирту (наприме р, фикс атор
Карнуа) ил и надис тил л ированной воде (наприме р, фикс аторы Н аваш инаи
М одил е вс кого). Спиртовые фикс аторы быс тро проникаю т в ткани, мате ри-
ал в них выде рживаю т от 30 минут до 24 час ов. В одные фикс аторы прони-
каю т в ткань ме дл е нне е , поэтому продол жите л ь нос ть фикс ации от с уток
до не с кол ь ких (в завис имос ти от разме ров фикс ируе мого мате риал а).
        П риме ром наибол е е прос того яде рного фикс атора явл яе тс я “У ксус-
н ый а лко го ль ”, име ю щ ий с ос тав 3:1: 3 час ти 96% этил ового с пирта и 1
час ть л е дяной укс ус ной кис л ота(98%).
        Ф икс ацию ос ущ е с твл яю т путе м погруже ния живого, с ве же го мате -
риал а(коре ш ки, бутоны и др.) в разл ичные ядовитые жидкос ти нас рок от
не с кол ь ких час ов до не с кол ь ких с уток. П родол жите л ь нос ть фикс ации за-
вис ит от объ е мафис ируе мого мате риал аи типафикс атора. В с ре дне м с о-
с тавл яе т от двух час ов до с уток. О бъ е м фикс ирую щ е й жидкос ти дол жен
значите л ь но (не ме не е че м в 50 раз) пре выш ать объ е м фикс ируе мого мате -
риал а. П ос л е фикс ации мате риал промываю т водой дл я удал е ния фикс и-
рую щ их ве щ е с тв ил и продуктов их разл оже ния (при фикс ации водными
фикс аторами) ил и с пиртом (при ис пол ь зовании с пиртовых фикс аторов). В
пос л е дне м с л учае зафикс ированный мате риал промываю т в тре х с ме нах