Цитологическое изучение растительных и животных клеток. Машкина О.С - 19 стр.

                                        19
дом) с оздае тс я оче нь выс окое напряже ние (от 50 тыс вол ь т и выш е ), что
с л ужит причиной ус коре ния эл е ктронов и с оздания из обл ачканаправл е н-
ного и оче нь мощ ного их потока. Биол огиче с кий объ е кт (с пе циал ь ным об-
разом подготовл е нный ) поме щ ае тс я на пути движе ния эл е ктронов. Э л е к-
тронный л уч проходит че ре з объ е кт, азате м че ре з с ис те му эл е ктромагнит-
ных л инз, функция которых – с оздать изображение и с корре ктировать е го
(фокус ировать пучок эл е ктронов), чтобы оно не откл онял ос ь , апопал о на
экран. Э л е ктроны, попадаянаобъ е кт, взаимоде й с твую т с ним (откл оняю т-
с я, рас с е иваю тс я, погл ощ аю тс я ил и проходят бе з изме не ния). В низу ко-
л онны рас пол оже н экран, покрытый л ю минес центным ве щ е с твом, с ве тя-
щ имс я при попадании нане го эл е ктронов. Когдаэл е ктроны ударяю тс я об
экран, пол учаю тс я с ве тящ ие с я точки, атам, где они рас с е яны, формируе т-
с я изображе ние . В ме с то л ю минис це нтного экрана изображе ние можно
с фокус ировать на фотопл ас тинку и пол учить с нимок, а также выве с ти с
помощ ь ю цифровой каме ры наэкран монитора.
        Пр ин цип ы изгот ов л ен ия п р еп ар ат ов дл я э л ект р он н ого м икр о-
с коп а п р ос в ецив аю щ его т ип а. С помощ ь ю прос ве чиваю щ е го эл е ктрон-
ного микрос копаможно изучать тол ь ко фи кси ро ва н н ые кл е тки. Кроме то-
го, мате риал дл я эл е ктронной микрос копии дол же н име ть такие с вой с тва,
которые позвол ил и бы изготовить из не го с ре зы намного бол е е тонкие , че м
приме няе мые в с ве товой микрос копии (уль т ра т о н ки е срезы тол щ иной до
0,1 мкм). В ме с те с те м дол жны быть ис кл ю че ны возможные ме ханиче с кие
повре жде ния и де формации мате риал а. Д л я взятия кус очкаткани не обхо-
димо ис пол ь зовать ножи выс ш е го каче с тва (с те кл янные , ал мазные ), т. к.
при этом ме ханиче с кие повре жде ниябудут с ве де ны к минимуму.
        Р ас с мотрим общ ие принципы и ос новные этапы изготовл е ния пре -
паратов дл я эл е ктронного микрос копа. П роце дура их изготовл е ния в
принципе с ходна с той , что ис пол ь зуе тс я в с ве товой микрос копии, хотя
име ю тс яи с ущ е с тве нные разл ичия.
        1. Ф икс ация мате риал а. Ж ивую ткань пос л е изме л ь че ния накус очки
до 1 мм 3 с начал а обрабатываю т глют а ро в ым а ль деги до м, который оче нь
быс тро проникае т и фикс ируе т ткань , не ис кажаяприжизне нной с труктуры
кл е ток. Зате м проводитс я допол ните л ь ная фикс ация рас твором че тыре х-
окис и о сми я ( OS O4 ). П риче м, ос мий (как тяже л ый ме тал л ) де й с твуе т не
тол ь ко как фикс атор, но и как ве щ е с тво, контрас тирую щ е е кл е точные
с труктуры (ос ущ е с твл яе т пре дварите л ь ное окраш ивание ).
        2. П ос те пе нное обе звоживание (дл яизбе жанияс морщ ивания) зафик-
с ированного мате риал а в с пиртах возрас таю щ е й конце нтрации, вкл ю чая
абс ол ю тный (100%) с пирт, зате м пропитывание мате риал а100% аце тоном
- рас творите л е м эпокс идной с мол ы (пос кол ь ку эпокс идная с мол а хуже
с ме ш ивае тс яс о с пиртом).
        3. Зал ивка мате риал а в эпо кси дн ые смо лы (ил и другие пл ас тики) и
пол име ризации бл оков. Д л язал ивки мате риал аис пол ь зуе тс яне парафин, а
чащ е вс е го эпокс идные с мол ы. Бл оки, пол уче нные из них, бол е е тве рдые ,