Цитологическое изучение растительных и животных клеток. Машкина О.С - 20 стр.

                                         20
однородные и эл ас тичные , позвол яю т пол учить оче нь тонкие с ре зы, кото-
рые не рас пл авл яю тс я(не рвутс я) под де й с твие м пучкаэл е ктронов.
       4. И зготовл е ние уль т ра т о н ки х срезо в . Д л я того чтобы эл е ктронный
л уч прош е л че ре з с ре з ткани, тол щ инас ре зане дол жнапре выш ать 1000 Å
(100 нм = 0,1 мкм, против 5-10 мкм дл я парафиновых с ре зов, пре дназна-
че нных дл я прос мотра с помощ ь ю с ве тового микрос копа). Такие с ре зы
можно пол учить тол ь ко науль т ра ми кро т о ме, с ое дине нным с бинокул яр-
ной л упой , что позвол яе т набл ю дать запроце с с ом ре зания. Д л я ре зки ис -
пол ь зую т пре имущ е с тве нно с те кл янные ножи (с кол ы с те кл а), что с вязано
с е го тве рдос ть ю и хрупкос ть ю (рис унок 5). Сте кл янные ножи обл адаю т
иде ал ь но ос трой , бе з зазубрин ре жущ е й пове рхнос ть ю . Н о они не дол го-
ве чны и ис пол ь зую тс я тол ь ко один раз. Р е же приме няю т ал мазные ножи,
которые могут с л ужить в те че ние не с кол ь ких л е т.
                                               Р ис унок 5. Схе ма изготовл е -
                                               ния и ис пол ь зования с те кл ян-
                                               ного ножа дл я ул ь трамикро-
                                               томии (Ч е нцов, 2004): 1 - на
                                               с те кл е де л ае тс я нас е чка; 2 - по-
                                               с л е разл ома образуе тс я ре жущ ая
                                               кромка (показано с тре л кой ); 3 -
                                               проце с с ре зки мате риал а (а), за-
                                               кл ю че нного в эпокс идную с мол у
                                               (б): образую щ ие с я с ре зы (в) по-
                                               падаю т напове рхнос ть жидкос ти
                                               над ре жущ им ножом (г).

       5. О краш ивание с ре зов. О бразую щ ие с я с ре зы (л е нту с ре зов) поме -
щ аю т нас пе циал ь ную ме л кояче ис тую ме тал л иче с кую с е тку (ане нас тек-
л о), азате м окраш иваю т с ол ями тяже л ых ме тал л ов (с винца, урана). И оны
тяже л ых ме тал л ов вс траиваю тс я во вс е ме мбранные с труктуры кл е тки,
ус ил иваяи выде л яяих контуры.
       6. П рос мотр ул ь тратонких с ре зов с помощ ь ю эл е ктронного микро-
с копа.
       Те хника изготовл е ния ул ь тратонких с ре зов открыл а огромные воз-
можнос ти дл я приме не ния эл е ктронной микрос копии буквал ь но во вс ех
обл ас тях биол огии и ме дицины.
       М ет оды кр иоул ьт р ам икр от ом ии. В пос л е дние годы вс е бол ь ш е е
приме не ние пол учаю т ме тоды приготовл е ния ул ь тратонких с ре зов бе з
фикс ации и зал ивки кл е ток в тве рдые пл ас тмас с ы. К ним относ ятс яме тоды
кри о уль т ра ми кро т о ми и , т.е . пол уче ние с ре зов с замороже нных ткане й ,
моме нтал ь но охл ажде нных до те мпе ратуры жидкого азота(-196 °С).
       М ет од зам ор аж ив ан ия-с кал ы в ан ия ис пол ь зуе тс я дл я изуче ния
с труктуры разл ичных ме мбранных компоне нтов кл е тки. О н закл ю чае тс я в
том, что объ е кт с начал абыс тро замораживаю т жидким азотом, азате м при
той же те мпе ратуре пе ре нос ят в с пе циал ь ную вакуумную ус тановку. Там