Медико-биологические и нравственные аспекты полноценного питания. Петров О.Ю - 95 стр.

5.2. Основные принципы создания трансгенных растений


ской науки, а также бесспорные технологические и экономические пре-
имущества трансгенных растений в сельскохозяйственном производстве.
   Основные задачи генной инженерии в создании трансгенных расте-
ний в современных условиях развития сельского хозяйства и общества
довольно многообразны, а некоторые из них фантастичны и в то же
время весьма перспективны по достижимости результатов.
  5.2. Основные принципы создания трансгенных растений
   Одной из основ метода, позволившего осуществлять различные дей-
ствия с генами, является открытие ферментов, названных рестрикцион-
ными эндонуклеазами или рестриктазами. Эти ферменты способны
распознавать определенную последовательность своей ДНК и расщеп-
лять «чужую» ДНК на мелкие фрагменты. В настоящее время выделены
рестриктазы, распознающие более 150 мест расщепления ДНК.
   Рестриктазы бывают мелко- и крупнорасщепляющими. Первые уз-
нают тетрануклеотид и вносят в молекулы больше разрывов, чем вто-
рые, узнающие последовательность из 6 нуклеотидных пар. Следует
отметить, что рестриктазы по-разному расщепляют ДНК. Одни вносят
разрывы по оси симметрии узнаваемой последовательности, а другие –
со сдвигом с образованием «ступеньки». В первом случае образуются
так называемые «тупые» концы, а во втором – «липкие», то есть фраг-
менты имеют на своих концах однонитевые взаимно комплементарные
участки длиной в 4 нуклеотида. Такие фрагменты удобны для создания
рекомбинантных ДНК.
   Рекомбинантные ДНК – это ДНК, образованные объединением in vitro
(в пробирке) двух или более фрагментов ДНК, выделенных из различ-
ных биологических источников.
   Сшивка фрагментов ДНК, полученных при помощи рестриктаз, про-
изводится тремя основными методами, зависящими от того, какие кон-
цы имеют фрагменты сшиваемых ДНК:
   – сшивка по одноименным «липким» концам – любые два фрагмента
ДНК, независимо от их происхождения, образовавшихся под действием
одной и той же рестриктазы, могут слипаться за счет образования водо-
родных связей между однонитевыми участками комплементарных нук-
леотидов;
   – сшивка по «тупым» концам. Это менее эффективный метод, по-
этому для получения рекомбинантных молекул ДНК пользуются «лип-
кими» концами;
   – сшивка фрагментов с разноименными «липкими» концами. Для
связи разноименных, то есть некомплементарных друг другу «липких»
концов, используют так называемые линкеры или «переходники».

                                     95