ВУЗ:
Рубрика:
Денатурация ДНК как переход спираль-клубок. Природа кооперативности. Профиль
плавления. Факторы, определяющие профиль перехода спираль-клубок в гомогенных и
гетерогенных химических структурах. Энтальпия и энтропия перехода. Свободная энергия
стабилизации нативной структуры.
д) Ренатурация ДНК. Условия ренатурации. Зависимость ре-
натурации от гомогенности препарата.
е) Молекулярная гибридизация ДНК. Обнаружение гибридных ДНК с помощью
тяжелой метки в градиенте плотности хлористого цезия. Установление сходства
нуклеотидной последовательности цепей ДНК путем молекулярной гибридизации.
Гибридизация РНКДНК.
4. Макромолекулярная структура РНК.
а) Сходство и отличие конформационных свойств РНК и ДНК:
б) Одноцепочечность РНК. Спирализация А РНК (вторичная структура).
Внутрицепочечные комплементарные взаимодействия. Длина и количество спиральных
участков. Неканонические типы спаривания оснований. Петли в спиралях. Температурное
разрушение ("плавление") спиралей; профили плавления; зависимость от дефектности и
длины спиралей.
в) Проблема взаимодействий между спиральными участками.
Структурные домены в РНК.
5.Однотяжевая ДНК и двутяжевая РНК вирусного происхождения.
III. СТРУКТУРА И СВОЙСТВА БЕЛКОВ
1. Первичная структура белков.
а) Аминокислотные остатки - мономеры белковых цепей. Различные типы аминокислот
и их строение. Пептидная связь. Полипептидная цепь.
б) Выделение белков и пептидов. Фракционное осаждение. Ионообменная
хроматография. Биоспецифическая (аффинная) хроматография. Гель-фильтрация.
Изоэлектрофокусирование в градиенте сахарозы.
в) Проверка гомогенности препаратов белков. Аналитическое
ультрацентрифугирование. Диск-электрофорез. Электрофорез в полиакриламидном геле с
додецилсульфатом. Изоэлектрофокусирование в полиакриламидном геле. Определение N- и
С-концевых аминокислотных остатков.
г) Определение аминокислотной последовательности. Гидролитическое расщепление
белка с помощью протеолитических ферментов. Секвенатор.
2. Пространственная структура белков.
а) Основные типы конформаций дипептидной единицы. Стерические карты
Рамачандрана и потенциальные карты дипептида. Спираль -, α-спираль, p-спираль,
полипролиновая спираль, β-структура, β-изгибы.
б) Вторичная структура белков. Спиральные и β-структурные
участки в глобулярных белках. Изогнутость β-структурных слоев в глобулярных белках
(правопропеллерность). Связь вторичной структуры с аминокислотной
последовательностью. Основные положения стереохимической теории вторичной структуры
глобулярных белков. Статистические закономерности в распределении аминокислотных
остатков в спиральных, β-структурных и нерегулярных участках
глобулярных белков.
Экспериментальные методы изучения вторичной структуры белков. Оптические методы.
Кривые циркулярного дихроизма. Оптическое вращение. Инфракрасная спектроскопия,
ЯМР-спектроскопия.
в) Третичная структура белков. Природа сил, стабилизирующих трехмерную структуру
белка. Гидрофобные взаимодействия. Солевые и водородные связи. Ван-дер-ваальсовы
взаимодействия. Рентгеноструктурный анализ глобулярных белков. Дифракция
рентгеновских лучей на кристаллической решетке. Структурный
фактор. Методы
Денатурация ДНК как переход спираль-клубок. Природа кооперативности. Профиль плавления. Факторы, определяющие профиль перехода спираль-клубок в гомогенных и гетерогенных химических структурах. Энтальпия и энтропия перехода. Свободная энергия стабилизации нативной структуры. д) Ренатурация ДНК. Условия ренатурации. Зависимость ре- натурации от гомогенности препарата. е) Молекулярная гибридизация ДНК. Обнаружение гибридных ДНК с помощью тяжелой метки в градиенте плотности хлористого цезия. Установление сходства нуклеотидной последовательности цепей ДНК путем молекулярной гибридизации. Гибридизация РНКДНК. 4. Макромолекулярная структура РНК. а) Сходство и отличие конформационных свойств РНК и ДНК: б) Одноцепочечность РНК. Спирализация А РНК (вторичная структура). Внутрицепочечные комплементарные взаимодействия. Длина и количество спиральных участков. Неканонические типы спаривания оснований. Петли в спиралях. Температурное разрушение ("плавление") спиралей; профили плавления; зависимость от дефектности и длины спиралей. в) Проблема взаимодействий между спиральными участками. Структурные домены в РНК. 5.Однотяжевая ДНК и двутяжевая РНК вирусного происхождения. III. СТРУКТУРА И СВОЙСТВА БЕЛКОВ 1. Первичная структура белков. а) Аминокислотные остатки - мономеры белковых цепей. Различные типы аминокислот и их строение. Пептидная связь. Полипептидная цепь. б) Выделение белков и пептидов. Фракционное осаждение. Ионообменная хроматография. Биоспецифическая (аффинная) хроматография. Гель-фильтрация. Изоэлектрофокусирование в градиенте сахарозы. в) Проверка гомогенности препаратов белков. Аналитическое ультрацентрифугирование. Диск-электрофорез. Электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом. Изоэлектрофокусирование в полиакриламидном геле. Определение N- и С-концевых аминокислотных остатков. г) Определение аминокислотной последовательности. Гидролитическое расщепление белка с помощью протеолитических ферментов. Секвенатор. 2. Пространственная структура белков. а) Основные типы конформаций дипептидной единицы. Стерические карты Рамачандрана и потенциальные карты дипептида. Спираль -, α-спираль, p-спираль, полипролиновая спираль, β-структура, β-изгибы. б) Вторичная структура белков. Спиральные и β-структурные участки в глобулярных белках. Изогнутость β-структурных слоев в глобулярных белках (правопропеллерность). Связь вторичной структуры с аминокислотной последовательностью. Основные положения стереохимической теории вторичной структуры глобулярных белков. Статистические закономерности в распределении аминокислотных остатков в спиральных, β-структурных и нерегулярных участках глобулярных белков. Экспериментальные методы изучения вторичной структуры белков. Оптические методы. Кривые циркулярного дихроизма. Оптическое вращение. Инфракрасная спектроскопия, ЯМР-спектроскопия. в) Третичная структура белков. Природа сил, стабилизирующих трехмерную структуру белка. Гидрофобные взаимодействия. Солевые и водородные связи. Ван-дер-ваальсовы взаимодействия. Рентгеноструктурный анализ глобулярных белков. Дифракция рентгеновских лучей на кристаллической решетке. Структурный фактор. Методы
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 33
- 34
- 35
- 36
- 37
- …
- следующая ›
- последняя »