Лабораторный практикум по общей микробиологии. Прунтова О.В - 24 стр.

UptoLike

Составители: 

Рубрика: 

4. Морфология клеточных структур
Клеточная стенка. Тонкую структуру клеточной стенки хорошо
видно лишь в электронном микроскопе. Для наблюдения клеточной стенки
в световом микроскопе применяют метод темного поля либо специальную
окраску, с помощью которой удается легко выявить границы между от-
дельными клетками, расположенными в виде длинных нитей или плотных
агрегатов. На обезжиренном стекле делают мазок клеток исследуемых бак-
терий, высушивают его на воздухе и фиксируют в течение 5 мин 5%-ным
раствором фосфоромолибденовой кислоты. Затем препарат промывают во-
дой и окрашивают не более 15 мин 0,02%-ным раствором кристаллвиолета.
Снова промывают водой, высушивают и микроскопируют с иммерсионной
системой. Клеточная стенка окрашивается в черный цвет, а цитоплазма - в
бледно-сиреневый.
Выявление кислотоустойчивости. Кислотоустойчивость - свойст-
во, характерное для некоторых микобактерий и нокардий. Оно заключает-
ся в сохранении окраски клетками этих бактерий при обработке их кисло-
той. Наибольшее распространение получил способ выявления кислото-
устойчивости по Циль-Нильсену. На обезжиренном предметном стекле го-
товят два мазка: исследуемых клеток и клеток кислотоустойчивых мико-
бактерий. Препарат высушивают на воздухе и фиксируют над пламенем
горелки. На мазки помещают фильтровальную бумагу, заливают препарат
карболовым фуксином Циля и затем 2 - 3 раза подогревают его до появле-
ния паров, держа стекло высоко над пламенем горелки. За появлением па-
ров наблюдают, глядя на мазок сбоку, и при их появлении тотчас отстав-
ляют препарат в сторону. После этого препарату дают остыть, снимают
фильтровальную бумагу, сливают краситель и мазок промывают водой. За-
тем препарат обесцвечивают 5%-ным раствором Н2SO4. Для этого пред-
метное стекло погружают 2 -3 раза в стакан с кислотой, не задерживая его
в ней. Препарат вновь тщательно промывают водой и докрашивают 3-5 мин
метиловым синим по Леффлеру. Краску сливают, препарат промывают во-
дой, высушивают и исследуют с иммерсионной системой. При строгом со-
блюдении режима окраски кислотоустойчивые клетки приобретают крас-
ный цвет, тогда как некислотоустойчивые - синий.
Нуклеоид. Довольно четко нуклеоид обнаруживается у следующих
бактерий: Proteus vulgaris, Azotobacter chroococcum, Bacillus megaterium,
24