Лабораторный практикум по общей микробиологии. Прунтова О.В - 28 стр.

вают водой, высушивают и микроскопируют с иммерсионной системой.
При правильном окрашивании грамположительные бактерии имеют сине-
фиолетовый цвет, грамотрицательные - розово-красный.
     Экспресс-метод определения грам-типа микроорганизмов. Метод
основан на разрушении клеток грамотрицательных бактерий в щелочной
среде и определении свободной ДНК. Для этого на предметное стекло на-
носят каплю 3%-ного раствора КОН и 1 петлю 24-часовой исследуемой
агаровой культуры, тщательно перемешивают. При тестировании грамот-
рицательных культур через 5 - 7 с при движении петли вверх образуется
слизистый след длиной 1 - 2 см; если слизь не образуется, то тестируемая
культура грамположительная.


                       Лабораторная работа № 9

                     Окраска бактерий по Граму

      Цель работы. Ознакомиться с техникой окраски бактерий по Граму.
      Материалы и оборудование. Микроскоп, предметные стекла, бак-
териологическая петля, спиртовка, чистые предметные стекла, столик для
окрашивания препаратов, промывалка с водой, красящая бумага с кристал-
лвиолетом или 1%-ный раствор кристаллвиолета или генцианвиолета, рас-
твор Люголя, 96%-ный этанол, 0,1%-ный раствор фуксина или раствор
Пфейфера, чистые культуры контрольных (с известным типом окраски)
грамположительных и грамотрицательных бактерий и исследуемые мик-
роорганизмы, иммерсионное масло для микроскопии.
      Ход выполнения работы
      1. Приготовьте на одном предметном стекле три фиксированных
мазка бактерий: а) контрольной грамотрицательной культуры с одного
конца стекла; б) контрольной грамположительной культуры с другого кон
ца стекла и в) исследуемой культуры в центре стекла. Мазки должны быть
тонкими, клетки бактерий должны быть равномерно распределены на
стекле, иначе окрашивание будет неправильным.
      2. Мазки окрашивают кристаллвиолетом в течение 2 мин.
      3. Кристаллвиолет смывают раствором Люголя и заливают мазки
этим же раствором на 2 мин.

28