Лабораторный практикум по общей микробиологии. Прунтова О.В - 27 стр.

UptoLike

Составители: 

Рубрика: 

клеток с плотной среды помещают в каплю разбавленного фуксина, сме-
шивают с каплей туши, закрывают покровным стеклом и просматривают с
объективом 40 х. На общем темном фоне препарата хорошо видны бес-
цветные капсулы, окружающие клетки микроорганизмов, окрашенные в
розовый цвет.
Окраска капсул по методу Гинса. На конец предметного стекла микро-
биологической петлей наносят каплю черной туши, вносят в нее клетки, хо-
рошо перемешивают и ребром покровного стекла делают мазок по всей по-
верхности стекла. Мазок высушивают на воздухе и фиксируют 5 - 10 мин
смесью Никифорова или 3 мин абсолютным метанолом. Далее мазок ок-
рашивают карболовым фуксином Циля, разбавленным водой в соотноше-
нии 1:3. Время окрашивания - 2 - 3 мин. Препарат промывают водой, вы-
сушивают на воздухе и микроскопируют с иммерсионной системой. На
темно-сером фоне препарата контрастно выделяются розово-малиновые
клетки бактерий, окруженные бесцветными капсулами.
Окраска по Граму. Эта окраска является важным диагностическим
признаком, она коррелирует со многими другими свойствами бактерий. По
способности окрашиваться красителями триметилфенолового ряда все
бактерии делятся на две группы: грамположительные и грамотрицатель-
ные. Грамположительные бактерии удерживают комплекс генцианового
фиолетового с йодом при обработке препарата спиртом и поэтому окраши-
ваются в фиолетовый цвет. Грамотрицательные бактерии не обладают та-
кой способностью и обесцвечиваются спиртом. При последующей обра-
ботке фуксином или сафранином они приобретают розовую окраску.
Окраска по Граму заключается в следующем. На одном обезжирен-
ном стекле делают мазки разных микроорганизмов: в центре - мазок кле-
ток исследуемой культуры, слева и справа - контрольных культур. Клетки
одной контрольной культуры должны быть грамположительными (напри-
мер Micrococcus luteus или Bacillus cereus), другой - грамотрицательными
(например Escherichia coli). Мазки следует готовить тонкими, чтобы клет-
ки равномерно распределялись по поверхности стекла и не образовывали
скоплений. Препарат высушивают на воздухе, фиксируют над пламенем
горелки и окрашивают в течение 1 - 2 мин карболовым генциановым или
кристаллическим фиолетовым. Затем краситель сливают и, не промывая
мазок водой, обрабатывают его 1 - 2 мин раствором Люголя до почерне-
ния. Сливают раствор Люголя, препарат обесцвечивают 0,1 - 1,0 мин 96%-
ным этиловым спиртом, быстро промывают водой и дополнительно окра-
шивают 1-2 мин водным фуксином. Краситель сливают, препарат промы-
27