Лабораторный практикум по общей микробиологии. Прунтова О.В - 54 стр.

                      Лабораторная работа № 21 Определение

         биохимических свойств Bacillus subtilis

      Цель работы. Освоить методики проведения биохимических тестов
для определения ферментативных свойств и идентификации бактерий.
      Материалы и оборудование. Чистая культура Bacillus subtilis в
чашках Петри с МПА, бактериологические петли, спиртовки, стерильные
пробирки, предметные стекла, перекись водорода, среды с моно-, ди-, по-
лисахаридами и спиртами, содержащие индикаторы; пробирки с МПБ;
пробирки с 2 - 3%-ной пептонной водой; растворы цистина и цистеина,
лакмусовая бумага, пробирки с мясо-пептонной желатиной, системы инди-
каторные бумажные (СИБ) для идентификации энтеробактерий, производ-
ства Нижегородского предприятия бактерийных препаратов; стерильный
физиологический раствор, термостат с температурой 37 0С.
      Ход выполнения работы
      1. Ознакомьтесь с инструкцией, прилагаемой к системе индикатор
ной бумажной (СИБ), для идентификации энтеробактерий и выберите с
помощью преподавателя необходимый Вам набор тестов из этой системы.
      2. Разлейте стерильный физиологический раствор в стерильные
пробирки по 0,3 мл (по две пробирки на один тест: одна контрольная, ин
кубируется без бактерий, а вторая - опытная), внесите в ряд опытных про
бирок одинаковое количество (одна петля агаровой культуры или 0,1 мл
бульонной культуры) исследуемой культуры бактерий.
      3. В соответствии с инструкцией внесите в пробирки бумажные
диски тестов и инкубируйте пробирки при температуре 37 0С в соответст
вии с инструкцией.
      4. Засейте чистую культуру исследуемых бактерий бактериологиче
ской петлей на среды с моно-, ди-, полисахаридами и спиртами, предос
тавленные преподавателем, и инкубируйте их в течение 18 -24 ч при тем
пературе 37 °С.
      5. Для определения каталазной активности на предметное стекло
нанесите каплю 3%-ного раствора перекиси водорода, внесите в нее петлю
исследуемой агаровой или бульонной культуры бактерий и тщательно пе
ремешайте. При положительной реакции (наличии каталазы) перекись во
дорода будет разлагаться с образованием воды и выделением кислорода в
виде пузырьков.
54