Лабораторный практикум по общей микробиологии. Прунтова О.В - 7 стр.

UptoLike

Составители: 

Рубрика: 

вают и 5-минутную экспозицию в насыщенном паре при 121 °С. Стерили-
зацию текучим паром под давлением осуществляют в автоклавах. Авто-
клав представляет собой металлический двустенный резервуар, способный
выдерживать высокое давление, в который помещают стерилизуемый ма-
териал на специальную подставку. Предметы следует размещать не слиш-
ком плотно, так как пар должен проходить между ними, иначе они не на-
греваются до нужной температуры и могут остаться нестерильными. По
окончании времени стерилизации автоклав открывают, когда давление в
нем сравняется с атмосферным. Преждевременное открывание крана
автоклава недопустимо, так как перегретые среды при резком снижении
давления сразу же бурно закипают, смачивают и даже иногда выталкивают
ватные пробки, что нарушает впоследствии стерильность материала.
К работе с автоклавом допускаются только подготовленные лица!
Подготовка сред к стерилизации. При автоклавировании 3 - 5 %
жидкости теряются в результате испарения, поэтому рекомендуется в при-
готавливаемые среды добавлять сверх объема примерно 5% дистиллиро-
ванной воды. Тогда после стерилизации среда (раствор) будет иметь тре-
буемую концентрацию. Среды обычно стерилизуют в пробирках, колбах,
бутылях. Емкости заполняют средой не более чем на половину их высоты,
чтобы предотвратить смачивание пробок. Сосуды со средами закрывают
ватными пробками с бумажными колпачками. Стеклянные, резиновые,
корковые и другие пробки завертывают в двойной слой оберточной бумаги
и стерилизуют привязанными к склянке, закрытой ватной пробкой.
Выбор режима автоклавирования. В микробиологической практике
стерилизацию в автоклавах осуществляют при температуре в пределах
111-138 °С, т.е. от 0,5 до 2,5 атм. Температура ниже 111 °С не может счи-
таться надежной; а выше 138 0С, как правило, не является необходимой, к
тому же, чем выше давление пара, тем сложнее условия эксплуатации ав-
токлава. Микробиологи чаще всего стерилизуют среды при 0,5 и 1 атм.
Температура и длительность автоклавирования питательных сред
определяются, прежде всего, их составом, термоустойчивостью или термо-
лабильностью компонентов. Такие легко разрушающиеся субстраты, как
молоко или желатиновые среды, а также субстраты, содержащие сахара,
7